二苯乙烯苷抗痴呆作用及机制分析-anti - dementia effect of stilbene glycoside and its mechanism analysis.docxVIP

中 文 摘 要目的： 探讨二苯乙烯苷抗痴呆作用及其机制。方法 ：6 月龄快速老化模型小鼠 SAMP8 50 只，随机均分为 SAMP8 空 白组，阳性药石杉碱甲对照组，高、中、低剂量 TSG 组(0.3，0.1，0.033 g〃kg-1d-1)共 5 组；6 月龄正常老化小鼠 SAMR1 鼠 10 只为正常对照组。各 组分别灌胃相应药物 45 d 后，采用 Morris 水迷宫方法，以逃避潜伏期、 原平台象限停留时间、探索试验、反向试验等指标观察其行为学改变。 试验结束后继续灌胃给药至 60d 后，应用实时定量 PCR 法检测海马组织 β淀粉样蛋白前体（APP）、早老蛋白-1（PS1）、早老蛋白-2（PS2）和载 脂蛋白（ApoE）mRNA 的表达，Western-blot 法测定 P-tau396 蛋白的表 达，RT-PCR 法测定β分泌酶（BACE）的表达。结 果： 隐蔽平台试验第 1 天起，SAMR1 对照组的逃避潜伏期即明 显短于 SAMP8 组，差异具有显著性（P0.05），说明同一种系的正常老 化老鼠学习记忆能力比快速老化老鼠强。石杉碱甲阳性药对照组和 TSG 组从第 3 天起，逃避潜伏期明显短于 SAMP8 空白对照组，差异具有显著 性（P0.05），说明用药后能改善快速老化老鼠的学习记忆能力。TSG 组 与阳性药组比较无显著性差异(P0.05)。探索试验中，SAMR1 对照组、 阳性药石杉碱甲对照组和 TSG 组的停留原平台象限时间和穿越原平台次 数均明显多于 SAMP8 空白对照组，差异具有显著性（P0.05），说明正 常老化老鼠和用药后 TSG 各组的记忆能力比 SAMP8 空白对照组强。反 向试验中，逃避潜伏期明显短于 SAMP8 空白组(P 0.05)。可视平台试验 结果各组无差异。SAMP8 空白对照组小鼠 APP、PS-1 及 PS-2 mRNA 2-△ △ CT 值，与 SAMR1 比较，明显提高（P0.05）。TSG 组和石杉碱甲阳性药对照组与 SAMP8 空白对照组比较，APP、PS-1 及 PS-2 mRNA 2-△ △ CT 值明显降低(P0.05)，即 APP、PS-1 及 PS-2 mRNA 表达下调。同时 TSG 组与 SAMP8 空白组比较 BACE mRNA 表达下调，差异具有统计学意义( P 0.05)。TSG 组对 ApoE 及 P-tau(Ser396)蛋白表达与 SAMP8空白组比较无显著差异。结 论 ：灌胃给药二苯乙烯苷能够提高 SAMP8 鼠的记忆能力，能降低 APP，BACE（β-分泌酶），PS（γ-分泌酶）的基因表达，即二苯乙烯苷 对痴呆小鼠 SAMP8 有显著地抗痴呆作用，能提高 SAMP8 鼠的学习记忆 能力。关键词：老年性痴呆；Morris 水迷宫；二苯乙烯苷；蛋白质印迹；实时 荧光定量 PCRStudy on the anti-dementia effects and its mechanisms of 4′-tetrahydroxy-stilbene-2-O-β-D-glycoside (TSG)ABSTRACTObjective: To study the anti-dementia effects and its mechanisms of 4′-tetrahydroxy-stilbene-2-O-β-D-glycoside (TSG).Methods: Fifty 6-month-old SAMP8 were randomized into 5 groups : SAMP8 untreated control group, huperzine A control, low-, mid- and high- dose groups of TSG, with 10 mice in each group. Another ten 6-month-old SAMR1 mice were assigned to normal control group. After medication for forty-five days, Morris water maze test was used to assess the change of learning and memory abilities in each group. After medication for 60 days, theexpression of APP、PS1、PS2 and ApoE mRNA in hippocampus was assayedby real-time quantitative reverse transcription-PCR．And the e