XF技术在植物研究领域的应用.pptx

OOOOOOOOO222222222+H+H+H+H++HHXF 技术在植物研究领域的应用Respiration rates of Arabidopsis thaliana seeds(a) Respiration rate of the first 110 min post-imbibition of 1mg of Col-0 seeds. Vertical linesindicate the time of addition of KCN (2uM) and salicylhydroxamic acid (SHAM) (5mM). (b) Respiration rate of 1mg of Col-0 seeds which were untreated and assayed directly on imbibition (control),incubated in buffer at room temperature for 100 min beforemeasurements (pre-treated) or heated at 100℃ for 1 h in a buffer solution before measurement.采用XF96对拟南芥的三个关键部位进行了研究：叶片，根尖和种子。测量拟南芥单片叶子上不同区域的叶片样本呼吸率图b显示中脉部分比两侧叶片呼吸率高。图c以重量做normalization后，中脉部分呼吸率则变低。该结果显示，叶面的取材位置会影响OCR的测量。检测拟南芥叶子的发育，年龄和大小对氧消耗率的影响图a为生长4周的植株，图b为短日照生长6周的植株。结果显示，从成熟叶子到未成熟叶子，OCR逐渐升高。XF96可以同时测量所有叶片，避免取材时间和测量时间不同带来差异。正在生长的根尖的呼吸率与已扩伸出的根部呼吸率之间的差异，被认为是决定根部生长率的一个重要影响因子。图b显示根尖OCR是已扩伸部分的3倍。有文献报道，用NaCl处理植物，根据所研究植物种类的不同会刺激或抑制根部呼吸。文中用100mM和200mM的NaCl处理根尖10min，对OCR值无明显影响，而400mM的NaCl降低OCR值。进一步实时检测不同浓度的NaCl对根尖OCR的作用，发现200mM NaCl在1h后开始降低OCR值。因此，利用XF系统可以监测低浓度盐对OCR的时间依赖性作用。检测种子在发芽过程中的OCR变化，及不同处理的影响。总结：XF技术为研究植物组织呼吸提供了新的检测手段，高通量实时动力学检测为拟南芥突变体研究，表型筛选，大范围生态型比较提供了可能性。并在植物呼吸的研究中，将分子学研究与生理学研究相结合提供了新的途径和思路。题目：琥珀酸脱氢酶组装因子2（SDHAF2）对拟南芥线粒体复合物II的装配和活性，及维持正常根部伸长是必须的sdhaf2拟南芥植株初生根的伸长受到抑制（图a），线粒体复合物II（SDH）的装配和活性降低。Malonate是SDH抑制剂，表型模拟sdhaf2植株。用XF96测量根尖氧消耗率，sdhaf2植株氧消耗降低(图c)，解释了代谢能力降低导致能量产生不足影响了根尖伸长。