2.11理化检验方法汇编(糖检验).docVIP

11乳糖、蔗糖和总糖的测定 【范围】 本文件规定了莱茵-埃农氏法测定糖的方法。 【方法提要】 乳糖：样品经除去蛋白质以后，在加热条件下，直接滴定已标定过的费林氏液，样液中的乳糖将费林氏液中的二价铜还原为氧化亚铜。以次甲基蓝为指示剂，在终点稍过量时，乳糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝。根据样液消耗的体积，计算乳糖含量。 蔗糖：样品除去蛋白质后，其中蔗糖经盐酸水解转化为具有还原能力的葡萄糖和果糖，再按还原糖测定。将水解前后转化糖的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量。 【仪器】 常用理化实验室仪器 【试剂】 费林试剂 次甲基蓝：10g/L 盐酸溶液：体积比为1：1 酚酞溶液：0.5g酚酞溶于75mL体积分数为95%的乙醇中，并加入20 mL水，然后再加入约0.1 mol/L的氢氧化钠溶液，直到加入一滴立即变成粉红色，再加入水定容100 mL。 氢氧化钠：（NaOH）为300g/L。取300g氢氧化钠，溶于1000 mL水中。 乙酸铅：取200g乙酸铅，溶解于100 mL水中。 草酸钾-磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g，磷酸氢二钠7g,溶解于100 moL水中。 【操作步骤】 1检查天平水平气泡是否在中央，若不在，将其调至中央。 2戴上手套，将小烧杯放在天平内，清零。 3称样前用称样勺将粉再次混和后 ，称取样品2g（准确至0.01g）,用100ml水分数次溶解并洗入250ml容量瓶中。 4加4ml乙酸铅、4ml草酸钾-磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂时都要徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度。静止数分钟，用滤纸过滤，弃去最初25ml滤液后，所得滤液滴定用。 5预滴定：将此滤液注入一个50ml滴定管中，待测定。取5ml费林甲液，5ml乙液边加边摇，加20ml水，置电炉上加热，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15s，加入3滴次甲基蓝，然后徐徐滴入乳糖至蓝色完全褪尽为止，读取乳糖的毫升数。 6精确滴定：另取5ml费林甲液，5ml乙液边加边摇，加20ml水，一次加入比预备滴定量少0.5～1.0ml的乳糖溶液，置于电炉上，使其在2min内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态2min，加入3滴次甲基蓝，然后一滴一滴徐徐滴入乳糖溶液，待蓝色完全褪尽即为终点。以此滴定量作为计算的依据（在同时测定蔗糖时，此即为转化后滴定量）。 7结果表述 F1*f1*0.25*100 L= V1*m 式中：L-样品中乳糖的质量分数，g/100g； F1-由消耗样液的毫升数查表所得乳糖数，mg； 　 f1－费林氏液乳糖校正值； 　V1－滴定消耗滤液量，ml； 　 ｍ－样品的质量，ｇ。 8的测定 取50ml样液于100ml容量瓶，加水10ml,再加入10ml盐酸，置75℃水浴锅中，时时摇动，在2min30s至2min45s之间，使瓶内温度升至67℃。自达到67℃后继续在水浴中保持5min，于此时间内使其温度升至69.5℃，取出，用冷水冷却，当瓶内温度冷却至35℃时，加2滴酚酞指示剂，用氢氧化钠中和至呈中性，冷却20℃，用水稀释至刻度，摇匀。并在此温度下保温30min后按4.7.5，24.6滴定。 9蔗糖计算 样品中蔗糖含量（g/100g）=(L1-L2)*0.95 F2*f2*0.25*100 L1= V1*m 式中： F2-由测定乳糖时消耗样液的毫升数查表所得转化糖数，mg； 　 f2－费林氏液蔗糖校正值； 　 V1－滴定消耗滤液量，ml； 　 ｍ－样品的质量，g。 F3*f2*0.50*100 L1= V2*m 式中： F3-由V2查得转化糖数，mg； 　 f2－费林氏液蔗糖校正值； 　 V2－滴定消耗的转化液量，ml； 　 ｍ－样品的质量，g。 【允许差】 由同一分析人员在短时间间隔内测定的两个结果之间差值，不应该超过结果平均值的1.5% 文件名称： 检验方法汇编 文件编号： 安达-C-ZL-化验-002-1/2 版本号： 01 修订号： 00 发放日期： 2009-05-10 实施日期： 2009-05-10 受控状态： 受控 发送区域： 化验室 第65页 共115页 充分理解 执行到位 充分理解 执行到位