生化课件第十六篇 章 RNA的生物合成.pptVIP

依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 依据是否需要蛋白质因子的参与，原核生物转录终止分为 ： Rho因子（ ρ 因子 ）： Rho因子是rho基因的产物，广泛存在于原核和真核细胞中，由6个亚基组成，分子量300KD。Rho因子结合在新生的RNA链上，由5’端向3’端的方向移动。 Rho因子有ATP酶的活性和解螺旋酶的活性 依赖Rho (ρ)因子的转录终止 RNAP slows down Elongating complex is disrupted Rho binds to RNA Rho catches up / ATP-dependent RNA-DNA helicase ter site 2. 非依赖 Rho因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 Stem-loop structure 非依赖Rho的转录终止 ① RNA产物3’端往往形成茎环结构，该结构阻碍RNA聚合酶前移。 ③ 寡聚U有利于RNA不再依附DNA模板链而脱出。 5’ 3’ 3’ 5’ ②转录产物中有密集的G-C配对，形成茎环结构，其后有一串寡聚U。rU:dA最不稳定。 茎环结构使转录终止的机理 使RNA聚合酶变构，转录停顿； 使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 5′pppG 5? 3? 3?5? RNA-pol Core enzyme 杂化双链形成的机会减小 寡聚的U促使RNA从模板链脱落 第三节 真核生物RNA的生物合成 真核生物的RNA聚合酶 二、真核生物的转录起始 （一）转录起始 真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ POL-Ⅱ TFⅡF ⅡA ⅡB 由RNA-Pol Ⅱ催化转录的PIC POL-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE CTD- P PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 2.反式作用因子(trans-acting factors) 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，现已发现数百种，统称为。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的，则称为转录因子(transcriptional factors, TF)。 真核生物编码基因两侧的DNA序列，可影响自身基因的表达活性，通常是非编码序列，包括启动子、增强子、沉默子 转录起始点 顺式作用元件(cis-acting element) AATAAA 切离加尾 转录终止点 修饰点 外显子 翻译起始点 内含子 TATA盒 CAAT盒 GC盒 OCT-1 增强子 OCT-1：ATTTGCAT八聚体（octomer） （二）转录延长 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。 RNA-Pol RNA-Pol RNA-Pol 核小体 转录延长中的核小体移位 转录方向 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA （三）转录终止 —— 和转录后修饰密切相关。 真核生物的转录后修饰 Post-transcriptional Modification 第四节 几种主要的修饰方式 1. 剪接(splicing) 2. 剪切(cleavage) 3. 修饰(modification) 4. 添加(addition) mRNA的转录后加工 tRNA的转录后加工 rRNA的转录后加工 hnRNA （hetero-nuclear RNA, hnRNA） 核内出现的转录初级产物，分子量往往比在胞浆内出现的成熟mRNA大几倍，甚至数十倍，核内的初级mRNA称为核内不均一RNA。 一、真核生物mRNA的转录后加工 加帽、加尾、剪接 核内不均一RNA 成熟mRNA 5?端形成 帽子结构 (m7GpppGp —) 3?端加上多聚腺苷酸尾巴 (poly A tail) 3. 中间非编码序列的切除、拼接 5’-末端：m7G-ppp5’-Np（帽） 蛋白质合成时：促进核蛋白体与mRNA的结合，加速翻译的起始速度 增强mRNA的稳定性，防止被核酸酶水解 3’-末端：polyA（尾） 参