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Chapter 4-* 三、酶催化反应的条件温和酶在接近生物体温的温度和接近中性的环境下起反应。 四、酶的催化活力可被调节控制 酶参与细胞所有代谢路径 Chapter 4-* 第三节 酶促反应动力学 Enzyme activity （酶活力，酶活性） Active unit（酶的活力单位） Specific activity（酶的比活力） Determination of enzyme activity (p183－185) Chapter 4-* Enzyme activity 定义指酶催化一定化学反应的能力用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应速度（初速度）来表示 方法测定产物增加的量或底物减少的量eg. 化学滴定、比色、测定紫外吸收、荧光测定 实验—淀粉酶活力的测定 Chapter 4-* Active unit （U）p184 酶活力单位（U）1个酶活力单位，是指在某种酶在最适条件下，单位时间内底物的减少量或产物的生成量时需要的酶量规定的。 国际单位(IU) 特定条件下，一分钟内催化1微摩尔底物转化的酶量定义为一个酶活力单位。 特定条件：温度—25oC 其他条件（eg. pH及底物浓度）均采用最适条件。 习惯用法eg. ?-淀粉酶，用每小时催化1g可溶性淀粉液化所需要的酶量来表示。 Chapter 4-* Specific activity 比活力每毫克蛋白所具有的酶活力 单位单位/毫克蛋白 （U/mg蛋白质） 对同一种酶，比活力愈高，酶愈纯 Chapter 4-* Example 称取25mg蛋白酶粉配制成25毫升酶溶液，从中取出0.1毫升酶液，以酪蛋白为底物，用Folin-酚比色法测定酶活力，得知每小时产生1500 ?g酪氨酸。另取2毫升酶液，用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2毫克。若以每分钟产生1?g酪氨酸的酶量为1个活力单位计算，根据以上数据，求出： 1毫升酶液中所含的蛋白质量及活力单位。 比活力 1克酶制剂的总蛋白含量及总活力。 Chapter 4-* Kinetics of enzyme-catalyzed reactions(p171) 底物浓度 （substrate concentration) pH 温度 (T) 酶浓度 (enzyme concentration) 激活剂 (activator) 抑制剂 (inhibitor) 影响酶催化反应速度的因素 Chapter 4-* Substrate concentration 酶催化应速度与底物浓度的关系 p171 一底物或其他底物浓度不变时适用 底物浓度 产物生成速率 一级反应 零级反应 混合级反应 Chapter 4-* 米氏方程 Michaelis Menten 后经Brigg-Haldane 修正 Chapter 4-* （1）测定速度为初速度，[S]消耗在5％以内 （2）[S]浓度大大超过[E]，[S]降低忽略不计 （3）ES 的生成量与消失量动态平衡 E S + P + S E E 快速平衡假定 Chapter 4-* E + S ES E + P K2 k1 k3 米氏方程的推导 Vmax [S] v ＝ ──── Km + [S] k4 Chapter 4-* 米氏方程的求法 Km S vo 直接作图 1/2 Vmax - 1 Km 1/S 1 vo 双倒数作图 1 Vmax Vmax [S] v ＝ ──── Km + [S] Chapter 4-* Chapter-4 Enzymes Chapter 4-* 第一节 酶的简介 史前时期 近代发展 现代酶学发展 古老的新科学 Chapter 4-* 磨粉 去糠 打碎 成酒 发酵 装瓶 麦芽 萌发 浸润 史前时期 Chapter 4-* 1857年法国微生物学家提出酒的发酵是活酵母细胞起作用 1878年 William Kühne 首先提出使用酶这一名称 希腊词“en”?in， “zyme” ? yeast or leaven 1879年Buchner兄弟阐述了酵母的酒精发酵及离体酶的作用。 1926年，脲酶的结晶 近现代 Chapter 4-* 基因克隆、组织培养 50,000,000 小牛胃凝乳酶基因 大肠杆菌 酵母菌 Chapter 4-* Chapter 4-* 酶(enzyme)是活细胞内产生的具有 高度专一性和催化效率的蛋白质， 又称为生物催化剂. 几乎所有的酶都是蛋白质 酶＝蛋白质 酶的化学本质 Biocatalyst