第十二篇 章 核酸的生物合成 微生物学 生物化学 .pptVIP

⑵ DNA复制的延长 ? 滞后链合成的模板形成环，复制叉上的二聚体DNA聚合酶Ⅲ全酶同时合成两条子链。 前导链 (leading strand): 以亲代3’→ 5’ 链为模板，子代能 连续合成。 滞后链 (lagging strand): 以5’→ 3’为模板，不能连续合成。 冈崎片段 (Okazaki fragment): 滞后链上的小片段。 ? 半不连续复制（semidiscontinuous replication）：DNA复制过程中，新生的DNA链一条按5’→ 3’ 方向（与复制叉移动方向一致）连续合成，另一条按5’ → 3’ 方向（与复制叉移动方向相反）不连续合成。 4. DNA聚合酶Ⅲ 1. 解链酶 2. 单链结合蛋白 前导链 冈崎片段 3. 引物酶 5. 聚合酶Ⅰ 6. 连接酶 复制叉 引物 ⑶ DNA复制的终止 大肠杆菌环状DNA复制叉相遇即终止 ⑴ DNA旋转酶引入负超螺旋，消除复制叉前进时带来的扭曲张力。 ⑵ DNA解链酶解开双链DNA。 ⑶ SSB结合于DNA单链。 ⑷ DNA引物酶(在引发体中)合成RNA引物。 ⑸ DNA 聚合酶Ⅲ在两条新生链上合成DNA。 ⑹ DNA 聚合酶Ⅰ切除RNA引物，并补上DNA。 ⑺ DNA ligase连接一个冈崎片段。 小 结 ? 逆转录（reverse transcription）：以RNA为模板合成DNA的过程，与通常转录过程中遗传信息流从DNA到RNA的方向相反。 二、逆转录作用 ? 逆转录酶（reverse transcriptase）：催化逆转录反应的酶。 ? 许多具有RNA基因组的病毒含有这种酶，故这类病毒又称为逆转录病毒（retrovirus）。它们多是致癌病毒。 逆转录酶具有3种活性： ① 依赖RNA的DNA聚合酶活性 ② RNase H（核糖核酸酶H）活性 ③ 依赖DNA的DNA聚合酶活性 cDNA ? 反转录酶存在于所有致癌RNA病毒中，它的存在与RNA病毒引起细胞恶性转化有关。 ? 艾滋病毒（AIDS） 人类免疫缺陷病毒（HIV），也是一种反转录病毒，主要感染T4淋巴细胞和B淋巴细胞。 ? 一些物理化学因子如紫外线、电离辐射和化学诱变剂均可引起DNA损伤，破坏其结构与功能。然而在一定条件下，生物机体能使这种损伤得到修复。 三、DNA的损伤、修复和突变 ? 紫外线可使DNA分子中同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶碱基之间形成二聚体（TT），两个T以共价键形成环丁烷结构。CT、CC间也可形成少量二聚体（CT、CC），使复制、转录受阻。 ㈠、DNA损伤 ㈡、DNA修复系统 ? 细胞内具有一系列起修复作用的酶系统，可以除去DNA上的损伤，恢复DNA的双螺旋结构。目前已知有4种酶修复系统：光复活、切除修复、重组修复、SOS 修复，后三种不需要光，又称为暗修复。 1. 光复活 ? 可见光（400～500 nm）可激活光裂合酶，此酶能分解由于紫外线形成的嘧啶二聚体。 2. 切除修复 切开 切除 修复 连接 3. 重组修复 ? 切除修复发生在DNA复制之前，而当DNA发动复制时尚未修复的损伤部位，可以先复制，再重组修复。 4. SOS 修复 ? 避免差错的修复（error free repair）：光复合、切除修复及重组修复对DNA损伤的修复都不导致DNA突变。 ? 倾向差错的修复（error prone repair）：SOS修复。在DNA损伤后，DNA复制过程以脱氧核苷酸的聚合发生差错为代价，强行合成完整子代链的一种挽救性修复。 ? 光复合是利用光能，其余均利用ATP水解所释放的能量。 ? 光复合和切除修复是修复模板链；重组修复不是对损伤链直接修复，而是形成一条新的正常模板链。 ? SOS修复是导致突变的修复。 ㈢、DNA突变 ? 不能修复的损伤或修复过程带来的差错，将引起DNA序列的永久性改变。 ? 突变有三种形式：置换、插入、缺失 DNA复制的真实性？ 生物体DNA复制具有高度真实性，复制108-1010碱基对，只有一个错误碱基。 ① 聚合酶反应本身具有超常的忠实性 ② 聚合酶Ⅰ、Ⅲ的3’→ 5’外切酶功能 ③ dNTP的平衡 ④ DNA的损伤修复系统 ⑤ RNA引物的使用 第二节 RNA的生物合成 ? RNA的生物合成包括转录和RNA的复制 转录 复制 ? 细胞内的各类RNA，包括mRNA、rRNA和tRNA，都是以DNA为模板，在RNA聚合酶的催化下合成的。 此外，除逆转录病毒，其它的RNA病毒均以RNA为模板进行复制。 一、转录 ? 转录（transcription）：以一段DNA的遗传信息为模板，在RNA聚合酶作用下，合