RPHPLC测定血脉通片中丹参酮ⅡA的含量.docVIP

　　RPHPLC测定血脉通片中丹参酮ⅡA的含量 作者：廖华卫 朱彩燕 邓金梅 林茵 【摘要】 目的 建立血脉通片中丹参酮A的含量测定方法。方法 采用RPHPLC法，色谱柱：KromasilC18（250 mm×4.6 mm,5 μm）；流动相：甲醇水（体积比8515）；检测波长：270 nm流速：1 mL·min-1 。结果 丹参酮A在0.3232 μg～1.616 μg范围内有良好的线性关系，平均回收率是100%(RSD＝0.72％）。结论 本法操作简单、准确、重复性好，可用于血脉通片的质量控制。 【关键词】 反相高效液相色谱法；血脉通片；丹参酮A 　　Abstract:Objective To set up a RPHPLC method for determining the content of tanshinone ⅡA in Xuemaitong tablets. Methods Tanshinone ⅡA was analyzed on a Kromasil C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）column using methanolwater(85∶15) as mobile phase. The flow rate was 1 mL·min-1 and the detection wavelength 270 nm. Results The linear range of tanshinone ⅡA was 0.3232-1.616 μg and the average recovery was 100% with RSD 0.72%.Conclusion The method is simple, accurate, reproducible and rapid, which can be used for the quality control of Xuemaitong tablets. 　 　　Key words:RPHPLC; Xuemaitong tablet; tanshinoneⅡA 　　血脉通片由丹参、川芎、葛根、三七、冰片等药材组成，具有活血化淤、补中益气、利水逐邪的功效。临床上主要用于淤血闭阻引起的胸痹、胸闷、胸痛等症状，对冠心病、心绞痛均有良好的效果。 　　丹参为方中君药，其有效成分是脂溶性二萜化合物和水溶性酚酸类化合物，包括丹参酮A、丹酚酸B等。近年来，大量的临床和药理学实践表明，丹参对肝脏、心脏具有明显的药效作用，丹参能明显抑制肝细胞、心脏细胞脂质过氧化反应，增加超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛含量，使肝细胞、心脏细胞变性坏死减弱；而丹参酮A药理作用明显，是一种新的有效的细胞内脂质过氧化产物与DNA相互作用的抑制剂［1-3］。 　　为了有效地控制该制剂的质量，保证临床用药的疗效稳定、安全可靠，本文建立了测定血脉通片中丹参酮A的反相高效液相色谱含量测定方法，该方法灵敏度高、操作简便、快速、结果准确可靠、专属性强、重复性好，可用于血脉通片制剂的质量控制。 1仪器与试药 　　 　　WATERS2695/2996型高效液相色谱仪（美国）；自动进样器；Empower色谱工作站； 　　 　　血脉通片（广东药学院中药药剂教研室自制）；丹参酮A（0766－200011，中国药品生物制品检定所，供含量测定用）。甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。 　　2方法与结果 　　2.1色谱条件及系统适用性试验 　　色谱柱：KromasilC18（250 mm×4.6 mm,5 μm）；流动相：甲醇水（体积比8515）；流速：1 mL·min-1；检测波长：270 nm；柱温：28 ；进样量：20 μL。在此条件下，供试品中丹参酮A峰与其他组分峰能达到基线分离，丹参酮A峰保留时间约为11 min，理论板数按丹参酮A峰计应不低于2 000；分离度均大于1.5，拖尾因子在0.95～1.05范围内。见图1。 　　2.2阴性对照试验 　　 　　按处方量以相同工艺制备缺丹参的阴性对照，按上述方法测定,结果阴性对照色谱图中在与丹参酮A对照品色谱图相对应的保留时间处无色谱峰出现,其他成分对丹参酮A测定无干扰,见图1。A.丹参酮A对照品；B.血脉通样品；C.阴性样品 　　图1血脉通HPLC图谱　略 　　2.3样品溶液的制备 　　2.3.1对照品溶液的制备 　　 　　精密称取丹参酮A对照品16.16 mg置100 mL棕色量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，得到0.161 6 mg/mL的丹参酮A对照品储备液。精密量取1 mL至10 mL量瓶中，得浓度为0.016 16 mg/mL的丹参酮对照品溶液。 2.3.2供试品溶液的制备 　　 　　取本品20片,去糖衣，研细,精密称取约2 g,置10