生物氧化与氧化磷酸化2.pptVIP

第三节 氧化磷酸化作用 一、 氧化磷酸化和磷氧比（P/O）的概念 二、氧化磷酸化的偶联机理 三、 线粒体外NADH的氧化磷酸化作用 四、能荷 第31页/共46页 氧化磷酸化 代谢物在生物氧化过程中释放出的自由能用于合成ATP（即ADP+Pi→ATP）,这种氧化放能和ATP生成（磷酸化）相偶联的过程称氧化磷酸化。 类别： 底物水平磷酸化 电子传递水平磷酸化 ADP + Pi ATP + H2O 生物氧化过程中释放出的自由能 第32页/共46页 磷氧比（ P/O ） 呼吸过程中无机磷酸（Pi）消耗量和分子氧（O2）消耗量的比值称为磷氧比。即每消耗一原子氧时，有多少摩尔原子的无机磷被酯化为有机磷，产生多少摩尔的ATP。因此P/O的数值相当于一对电子经呼吸链传递至分子氧所产生的ATP分子数。 实测得NADH呼吸链： P/O~ 2.5 实测得FADH2呼吸链： P/O~ 1.5 即在NADH呼吸链中，将一对电子传递给O，实现了2.5次的磷酸化反应，而在FADH呼吸链只有1.5次. 第33页/共46页 电子的传递方向和释放的能量可能推动形成ATP的部位 -50.24kJ/moL -41.87kJ/moL -100.48kJ/moL 第34页/共46页 氧化磷酸化的偶联机理 1、化学渗透假说 2、氧化磷酸化的抑制 解偶联剂和离子载体抑制剂 氧化磷酸化抑制剂 第35页/共46页 化学渗透假说 目前公认的氧化磷酸化的偶联机制是1961年由Mitchell提出的化学渗透学说。1978年获诺贝尔化学奖 . 第36页/共46页 化学渗透假说 电子沿呼吸链传递时，释出的能量用于把 H＋ 由线粒体的基质穿过内膜泵到线粒体内膜和外膜之间的膜间腔中，膜间腔中的 H＋ 浓度高于间基中的 H＋浓度，线粒体的内膜外侧为正、内侧为负，于是形成一种跨线粒体内膜的质子梯度，产生了膜电势，即产生贮藏能量的电化学质子梯度。 正是由这种电化学质子梯度推动 H＋ 由膜间又穿过内膜上 ATP 酶复合体的 F0 部位返回到膜内基质中。此时在ATP 酶复合体的 F1 部位，发生 ATP 酶催化 ADP 磷酸化为 ATP 的反应。 第37页/共46页 化学渗透假说示意图 2H+ 2H+ 2H+ 2H+ NADH+H+ 2H+ 2H+ 2H+ ADP+Pi ATP 高质子浓度 H2O 2e- + + + + + + + + + _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 质子流 线粒体内膜 磷酸化 氧化 第38页/共46页 5 解偶联与氧化磷酸化的抑制 5.1 解偶联（uncoupling） 使电子传递与ATP的生成（磷酸化）分离。解偶联剂破坏质子梯度的形成，从而抑制ATP的生成，但不抑制电子的传递，因此电子传递过程中生成的自由能转变为热能。如解偶联剂2，4—二硝基苯酚（DNP）。 5.2 氧化磷酸化的抑制 抑制氧的利用，直接干扰ATP的生成。如CN-、N3-和CO 抑制Cyt a3将电子传递给氧，鱼藤酮抑制NADH还原酶将氢传递给CoQ，抗霉素A阻止电子从Cytb传递到c1。 第39页/共46页 三、 线粒体外NADH的氧化磷酸化作用 胞液中的3-磷酸甘油醛或乳酸脱氢，均可产生NADH。已知胞液中NADH+H+不能通过正常线粒体内膜而进入线粒体，那么胞液中的NADH是怎样氧化的呢？ 这些NADH可经穿梭系统而进入线粒体氧化磷酸化，产生H2O和ATP。 第40页/共46页 三、 线粒体外NADH的氧化磷酸化作用 ?苹果酸—天冬氨酸穿梭系统 ?磷酸甘油穿梭系统 酵解 （细胞质） 氧化磷酸化 （线粒体） 第41页/共46页 苹果酸-草酰乙酸穿梭作用 细胞液 线粒体内膜体 天冬氨酸 ?-酮戊二酸 苹果酸 草酰乙酸 谷氨酸 ?-酮戊二酸 天冬氨酸 苹果酸 谷氨酸 NADH+H+ NAD+ 草酰乙酸 NAD+ 线粒体基质 苹果酸脱氢酶 NADH+H+ Ⅳ Ⅰ Ⅱ Ⅲ 苹果酸脱氢酶 谷草转氨酶 谷草转氨酶 （Ⅰ、 Ⅱ、 Ⅲ、 Ⅳ为膜上的转运载体） 呼吸链 第42页/共46页 ?-磷酸甘油穿梭 （线粒体基质） 磷酸二羟丙酮 3-磷酸甘油 磷酸二羟丙酮 3-磷酸甘油 FAD FADH2 NADH?FMN ?CoQ ?b ?c1 ?c ?aa3 ?O2 NADH NAD+ 线粒体内膜 （细胞液） 第43页/共46页 能 荷 定义式：能荷= —————————