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还有蛋白质因子可特异识别、结合自身基因的调节序列，调节自身基因的表达，称顺式作用。 由某一基因表达产生的蛋白质因子，通过与另一基因的特异的顺式作用元件相互作用，调节其表达。 这种调节作用称为反式作用。 第31页/共57页 基本转录因子 转录调节因子 特异转录因子 转录激活因子 转录抑制因子 1. 转录调节因子分类（按功能特性） 第32页/共57页 基本转录因子 (general transcription factors) 是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA(mRNA、tRNA及rRNA)转录的类别。 第33页/共57页 * 特异转录因子(special transcription factors) 为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。 转录激活因子：起转录激活作用，通常是一 些增强子结合蛋白质。 转录抑制因子：起转录抑制作用，多数 是沉默 子结合蛋白质 第34页/共57页 2. 转录调节因子结构 DNA结合域（锌指结构） 转录激活域 TF 蛋白质-蛋白质结合域 （二聚化结构域） 第35页/共57页 最常见的DNA结合域 1. 锌指(zinc finger) C —— Cys H —— His 常结合GC盒 第36页/共57页 ２. 锌指结构是一类含锌的DNA结合蛋白质模体 C2H2型锌指（Zinc finger） 第37页/共57页 Zn Cys His 第38页/共57页 3. 亮氨酸拉链（Leu zipper） 亮氨酸拉链是蛋白质二聚体化(蛋白质相互作用的一种方式)的一种结构基础。 蛋白质通过亮氨酸拉链形成二聚体，大大增加对DNA的结合能力，调控基因表达。 第39页/共57页 在亮氨酸拉链近N-端有富含碱性(带正电荷)氨基酸残基的区域，是DNA的结合区。 亮氨酸拉链是一个高亮氨酸组成的α螺 旋，每两个螺圈出现一个亮氨酸，形成 拉链的一边。 两个蛋白质因子的α螺旋通过亮氨酸的疏水作用结合在一起形成拉链结构 第40页/共57页 亮氨酸拉链 第41页/共57页 2. α-螺旋 常结合CAAT盒 第42页/共57页 a-螺旋 常结合CAAT盒 碱性螺旋-环-螺旋 碱性亮氨酸拉链 第43页/共57页 真核RNA聚合酶Ⅱ在转录因子帮助下，形成转录起始复合物。 PolⅡ TFⅡH TAF TFⅡF TAF TAF TFⅡA TFⅡB TBP DNA TATA EBP TBP 第44页/共57页 第三节 反转录 以RNA为模版合成DNA的过程。 原料:dNTP 酶 :逆转录酶作用 1.逆转录 2.RNA酶 3.DNA聚合酶 第45页/共57页 逆转录酶(reverse transcriptase) 逆转录(reverse transcription) 逆转录酶 一、逆转录过程 第46页/共57页 逆转录病毒细胞内的逆转录现象 RNA 模板 逆转录酶 DNA-RNA 杂化双链 RNA酶 单链DNA 逆转录酶 双链DNA 第47页/共57页 逆转录酶 A AA A T T T T AAAA SI核酸酶 DNA聚合酶Ⅰ 碱水解 T T T T 分子生物学研究可应用逆转录酶，作为获取基因工程目的基因的重要方法之一，此法称为cDNA法。 以mRNA为模板，经逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链。 试管内合成cDNA cDNA ?complementary DNA? 第48页/共57页 二、反转录与癌变 致癌病毒： RNA致癌病毒（多数） DNA致癌病毒（少数） 第49页/共57页 第50页/共57页 病毒癌基因(virus oncogene,v-onc) 存在于病毒基因组中的癌基因， 细胞癌基因（cellular oncogene，c-onc）：生物正常细胞基因中的癌基因，也称原癌基因（proto-oncogene，pro-onc）。 第51页/共57页 功能上相关的癌基因家族分类 src家族：产物多具有酪氨酸蛋白激酶活性，能促进增殖信号的转导。 ras家族：编码小G 蛋白p21，参与cAMP水平的调节。 myc家族：编码核内DNA结合蛋白，调节其