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耐酸性α-淀粉酶的研究进展 安徽农业科学.JournalofAnhuiAgn.Sci.2010,38(20):10509—10511责任编辑李菲菲责任校对况玲玲 耐酸性淀粉酶的研究进展 贺胜英,唐湘华,洪涛,黄遵锡,.(1.宜宾学院实验与教学资源管理中心,四川宜宾644007;2.云南师范大学生命科学 学院,云南昆明650222;3.生物能源持续开发利用教育部工程研究中心,云南昆明650222) 摘要概述了耐酸性d一淀粉酶的产生茵的来源,先进的粗酶分离纯化技术以及酸性一淀粉酶的特性,介绍了国内外获得高产酶茵株的 研究进展并阐述了耐酸性d一淀粉酶的应用潜力和开发前景. 关键词酸性d一淀粉酶;菌株;研究进展 中图分类号0629文献标识码A文章编号0517-6611(2010)20—10509—03 ResearchProgressofAcid-resistantAmylase HESheng?yingetai(CenterofExperimentalTeachingandResourceManagement,YibinUniversity,Yibin,Siehuan644007) Abstractrheoriginofproducingstrainsofacid—resistantamylase.theadvancedtechnologyofcrudeenzymeseparationandpurificationandthe charactersofacid—amylaseweresummarized.Tducedstrainsathomeandabroadwasintro- duced.Theapplicationpotentialanddevelopmentprospectofd—amylasewerealSOdiscussed. KeywordsAcid0【.amylase:Strain:Researchprogress 酸性一淀粉酶是在酸性条件下水解淀粉的酶,在低pH 值条件下,以随机方式切断淀粉分子内的d.1,4糖苷键,水 解产物是低聚糖,麦芽糖和糊精等.目前,国内外市场中常 用的淀粉酶为中温,高温以及碱性o【.淀粉酶,其最适pH值 在6.0～10.0,在酸性条件下,其酶活性降低很明显,甚至失 去活性.随着我国淀粉质原料深加工工业的发展,工艺条件 的不断改变,一些淀粉原料深加工工艺需要在较低的pH值 条件下进行.所以,开发新型耐酸性仅一淀粉酶迫在眉睫. 1耐酸性钟淀粉酶产生菌的来源 早在1963年,日本研究者发现Aspergillusnr可以产酸 性一淀粉酶,之后美国,韩国,中国以及欧洲一些国家相继对 一 淀粉酶展开了研究.目前,工业上所用的酸性d一淀粉酶都 来源于微生物发酵产生,产耐酸l生OL一淀粉酶的菌株主要是芽 孢杆菌和曲霉…,如B.acidocaldariusA一2,B.acidocaldariu— sATCC27093J,B.1ichen@rmis,B.acillusdocaldariuslO1Is],A. 1icyclobacillusacidocaldarius_61’Aspergillus.niger,Aspergillus , Aspegilluskawachii[ , Thermomyoeslanugino— s珊. 2耐酸性iX”淀粉酶的分离纯化 为了得到纯化的耐酸性.淀粉酶,学者们研究了许多不 同的方法.李辉等首先对粗酶液超滤浓缩,然后用聚丙烯酰 胺垂直板凝胶电泳提纯….李勃等用酒精沉淀粗酶液,然 后用离子交换柱层析2次,最后用SDS—PAGE1凝胶电泳检 验酸性一淀粉酶的纯化程度.陈波等用4层纱布过滤发 酵液,先用4JD%的(NH)SO盐析,静置离心取上清,再用 40%的(NH):s0盐析,4℃过夜后离心取沉淀,再用Sepha— dexG.100柱层析,最后用SDS.PAGE凝胶电泳检测纯度. 刘旭东等先采用60%的(NH)SO盐析沉淀,然后用醋酸缓 冲液透析24h,再用AE—SepharoseFastFlow离子交换层析和 SephadexG-75柱层析,最后用SDS—PAGE凝胶电泳检测酶蛋 基金项目 作者简介 收稿日期 云南省自然科学基金项目(2005C0018Q);云南省应用基金 重点项目(2006C0004Z). 贺胜英(1974一),女,四川泸州人,在读硕士,实验师,从事 微生物酶工程研究.通讯作者,博士,教授,E-mail:huang- zunxi@163.com., 20】0_0.14 白的纯度.在耐酸性OL-淀粉酶的纯化专利中,欧洲使用 了一项高新的酶纯化技术,先将酶液调节pH值,然后保 温一段时间使糖化酶,最后变性的糖化酶被除去.这些先进 的酶纯化技术的发明,为耐酸性仅.淀粉