选择性bcl-2抑制剂abt-199联合卡铂对非小细胞肺癌细胞株a549的杀伤效应-killing effect of selective bcl - 2 inhibitor abt - 199 combined with carboplatin on non-small cell lung cancer cell line a549.docxVIP

果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献 均已在论文中作了明确说明并表示谢意。学位论文作者签名：日期： 学位论文使用授权声明本人完全了解安徽医科大学有关保留、使用学位论文的规定：学校有权保 留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权 允许论文进入学校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行 检索，有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。愿意将本人的学位论文提交《中 国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库》和《中国 学位论文全文数据库》中全文发表，并可以以电子、网络及其他数字媒体形式 公开出版，并同意编入 CNKI《中国知识资源总库》，在《中国博硕士学位论文评 价数据库》中使用和在互联网上传播。保密的学位论文在解密后适用本规定。学位论文作者签名：导师签名：日期：日期：目录.中文摘要1.英文摘要23 . 正文4)前言4)材料和方法7)结果15)讨论24)结论27)参考文献274. 附录345. 致谢356. 综述及参考文献36英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称NSCLCNon small cell lung cancer非小细胞肺癌SCLCSmall cell lung cancer小细胞肺癌CAcarboplatin卡铂FBSFetal bovine serum胎牛血清DMEMDulbeccos Modified Eagle Medium达尔伯克改良伊格尔培养基PBSphosphate buffer saline磷酸盐缓冲液MTTmethylthiazolyl tertrazolium assay四甲基偶氮唑蓝ODOptieal density吸光度DMSODimethyl sulphoxide二甲基亚砜FCMflow cytometry流式细胞仪PIpropidium lodide碘化丙啶PSphosphatidyl serine磷脂酰丝氨酸FITCfluorescein isothiocyanate异硫氰酸荧光素BCAbicinchoninic acid聚氰基丙烯酸正丁酯Caspasecysteinyl aspartate specific proteinase含半胱 氨酸 的天冬 氨 酸蛋白 水解酶CytcCytochrome C细胞色素 CPCDprogrammed cell death程序性细胞死亡Bcl-2B-cell lymphoma-2B 细胞淋巴瘤-2 基因选择性 Bcl-2 抑制剂 ABT-199 联合卡铂对非小细胞肺 癌细胞株 A549 的杀伤效应摘要 背景与目的：肺癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤，化疗是其重要治疗手段 之一，然而肿瘤耐药的产生往往造成化疗疗效不佳。有研究发现抗凋亡蛋白 Bcl-2 家族的过表达参与了肿瘤的耐药。在铂类耐药的肺癌患者，Bcl-2 也过表达。Bcl-2 抑制剂可作为一种新型抗肿瘤药物提高肺癌细胞对铂类药物的敏感性。本实验研 究 Bcl-2 抑制剂 ABT-199 联合卡铂对人非小细胞肺癌细胞 A549 的凋亡的增效作 用。方法： 四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测不同浓度两种药物单独作用不同时间后对 A549 细胞增殖的影响，观察低剂量下两种药物联合作用对 A549 细胞增殖的影响；流式 细胞术(FCM)检测 ABT-199 对 A549 细胞周期的影响以及两种药物联合作用下细胞 凋亡的变化；Western blot 法检测凋亡相关蛋白 Bcl-2、Bax、Bcl-xl、Mcl-1、Caspase-3 和 Caspase-9 的表达。结果： ABT-199 对 A549 细胞有增殖抑制作用且呈时间和浓度依赖性，低剂量 ABT-199 联合卡铂的抑制率高于卡铂单药（P0.01）。FCM 结果显示，随着 ABT-199 浓度的升高，A549 细胞发生不同程度的 G0/G1 期阻滞，联合用药组细胞凋亡率较 卡铂单药组明显增高（（37.3±1.8）%比（72.4±2.2）%）。Western blot 结果显示， 同单药组相比，联合用药组细胞 Bcl-2 水平明显下调（P0.01），Bcl-xl、Mcl-1 无 明显变化（P0.05），同时 Bax 水平增高，Caspase-3 和 Caspase-9 活性增加（P0.01）。 结论： ABT-199 可有效抑制人非小细胞肺癌细胞株 A549 增殖，诱导细胞发生 G0/G1 期阻滞，能与卡铂发生协同效应，联合应用显著诱导 A549 细胞凋亡。 关键词 ：非小细胞肺癌 NSCLC；ABT-199；Bcl-2 抑制剂；卡铂；协同效应1Killing Effect of Bcl-2 Selec