红细胞血型检测ppt课件.ppt

4.冻融放散技术 §适用范围 ：ABO抗体的放散，如新生儿溶血病的相关检测实验。 5.柠檬酸放散技术 §适用范围 ：用于解离红细胞膜上致敏的IgG抗体对红细胞进行抗原 的鉴定，但Kell系统的鉴定除外。 §注意事项 ：该方法可破坏Kell系统抗原，特别是K抗原，因 此本方法放散后的细胞不能进行Kll系统定型试验。 红细胞血型检测 * （四）吸收放散试验的应用 ☆ 证实存在于红细胞上的若抗原 ☆分离、鉴定混合液体 ☆除去血清中不需要的抗体 ☆浓缩低效价抗体 ☆核实抗体特异性 ☆利用吸收放散技术鉴定引起新生溶血病和免疫性输血反应的抗体 ☆研究鉴别免疫性溶血性贫血的抗体 红细胞血型检测 * 一、概述： 抗体能与有相应抗原的红细胞发生特异性凝集，体液中的可溶性抗原物质能与该抗体发生特异的中和，抑制了抗体凝集红细胞的作用。用这种可溶性物质来抑制抗体与红细胞凝集的试验，称为凝集抑制试验。常用于ABH或Lewis分泌状态的检查，帮助ABO亚型的确认以及特殊情况下（红细胞标本完全溶血） ABO血型的鉴定。 红细胞血型检测 * 二、抑制物处理及抗体标化 ☆收集液体 唾液标本作为抑制物，煮沸使酶失活。 ☆标化人源抗血清 抗体需通过倍比稀释，找出可也凝集红细胞至“﹢﹢﹢”的最高稀释度，并按照该稀释度进行稀释。 红细胞血型检测 * 三、唾液中可溶性ABH血型物质的检测 （一）结果分析 ☆ 阴性对照管的凝集强度一般为 ﹢﹢﹢～﹢﹢﹢，阳性 对照管的凝集强度应为﹣，盐水对照管凝集强度硬度 与相应的唾液测定管。 ☆ 在3排试管中任何一管红细胞不凝集，均表明检测出唾 液中存在相应的血型物质。 ☆ 稀释后的效价管可导致红细胞凝集，最高稀释倍数的倒 数即为唾液中血型物质的效价。 红细胞血型检测 * 四、血型物质的应用 （一）IgM抗体的中和 适用范围 ※尝试用于IgG抗-A和（或）抗-B效价的测定 ※ABO血型抗体的辅助鉴定 （二）特异性抗体的确定 适用范围 ※用已知的血型物质来检测未知抗体的特异性 红细胞血型检测 * 一、红细胞血型分子生物学检测技术 随着分子生物学技术的发展，检测基因结构和突变的方法不断涌新。尤其是PCR技术问世后，各种与PCR相结合的检测技术进一步推动了基因研究的发展。分子生物学技术应用与红细胞血型的检测，使红细胞血型分析的技术飞越了一个崭新的阶段。 红细胞血型分子生物学检测的的方法有：PCR-SSP技术、PCR-SSOP技术、PCR-RFLP技术、PCR-RDB技术、PCR-DNA测序、基因芯片、PCR指纹图等。 红细胞血型检测 * ※ PCR-SSP即序列特异性引物引导的PCR反应 ※ PCR-SSOP即序列特异性寡核苷酸探针 ※ PCR-SSCP即单链构象多态性 ※ PCR-RFLP即限制性片段长度多态性 ※ PCR-RBD即反向点杂交 ※ PCR-DNA测序 ※液相芯片法 又称悬浮点阵技术、xMAP（即灵活的多元分析平台）、多元流式荧光微球检测技术。 红细胞血型检测 * 二、应用 ★ABO疑难血型的鉴定 ★发现ABO血型新等位基因 ★对于ABO基因突变的研究 ★新生儿溶血病（HDN）的辅助诊断 ★某些疾病的病理研究 ★法医个体识别 红细胞血型检测 * 分子生物学检测血型技术的应用，使血型分析达到了更精细的水平，并因此发现了更多的血型的多的血型的多态性。分子生物学检测血型技术与传统的血清学技术比较，优点是试剂由化学合成，易于获得和标准化，取材容易，无需新鲜血样而仅需微量样品等，现已成为血清学方法的获得者和竞争者。 对小量含DNA的任何组织样品，用分子生物学分型技术对红细胞抗原den基因型做鉴定，不受血清中自身抗体、不规则抗体以及疾病和假、弱凝集的影响，对保证安全输血有着重要意义。 红细胞血型检测 * 红细胞血型检测 * 酶介质配血方法 红细胞血型检测 * 患者 献血者 主侧 次侧 主次侧 均加酶 ? 红细胞血型检测 * 37℃ 水浴30分钟 37 ℃ 离心 看结果 阳性 阴性 ? 结果的判断 （1）阳性