蛋白质与荧光探针的作用及其分析应用研讨.pdfVIP

摘 要 蛋白质是重要的生物大分子。人们对蛋白质的研究，主要集中在蛋白质定量分析和作 用机理两个方面。蛋白质定量测定既是生物化学和其它生物学科中经常涉及的分析内容， 又是临床检验中诊断疾病及评价疗效的重要指标，同时也是许多生物药物分离提纯中质量 检验及食品检验中常见的分析项目。荧光分析方法由于其灵敏度高、选择性好、方法简便 等优点，在生物大分子定量测定中备受青睐。近年来荧光探针染料与蛋白质结合后的荧光 特性、动力学特征、电化学特征、自聚特征等受到关注，并以此为基础建立分析方法。荧 光探针技术最大的特点是具有高度的灵敏性和极宽的动态响应范围，进一步建立高灵敏 度、低检测限的荧光探针定量测定蛋白质的方法具有重要意义。 本论文主要包括以下两个方面的内容： 1．概述了蛋白质化学基础，综述了蛋白质定量分析的主要方法及其在生物化学、药学、 食品和临床医学等方面的应用。 2．探索新的性能优良的荧光探针。 发射波长530nm处的荧光强度降低，其降低程度与蛋白质浓度在一定范围内成线性关系建 立了一种新的快速简单的荧光猝灭测定蛋白质的方法，该法线性范围为O～15m扎，检测 限为4毗∥L，对10 以酸性染料铝试剂作为测定牛血清白蛋白的荧光探针。在BsA浓度为O～50m∥L范围内， 蓝法测定的结果相吻合。 二聚体荧光染料作为一类新的荧光探针近年来引起了人们极大的兴趣。本论文以阳离 弱荧光二聚体为荧光探针，建立了测定蛋白质的新方法。研究发现，s1在SDBS的作用下， 自聚程度增加，体系荧光降低。而加入蛋白质后体系荧光增强，且增强程度与体系中的蛋 人血清蛋白的测定，结果令人满意。以4，5．二溴荧光素在阳离子表面活性剂溴化十六烷基 三甲基胺存在下形成的现场弱荧光二聚体作为测定人血清总蛋白的荧光探针，方法的线性 范围为O～20 mg几，检出限为5％g／L。对15．O T m∥L，相对标准偏差为0．94％。与经典的考马斯亮蓝法相比较，二者符合良好。 关键词：蛋白质；荧光探针；荧光猝灭；染料二聚体；表面活性剂 II Abstract of Proteinsare macrom01ecules．Thedete蛐iIlation isnot importantbiology proteiIls0nly the contentinthefieldsof andother aIlalytical chemistry，bioch啪istrybiology 靠equently alsoan indexfor diSeaseand curativeeffectsiⅡ subjects，butimponant diagnosing eValuating dinical alsoafamiliar iteminthe testofmost tests，andsimultaneOusly analytical quality it and medicamentaIldfoodtests．S0is tofiⅡd separationpurificationbi0109y Veryimponam newnuorescencewith andlowdete硝onlim“． probes1lighsensitivity 1． h tlle basewas some