基质辅助激光解吸离子化飞行时光质谱的新基质及其应用.pdf

摘要 摘 要 DIOS．MS技术在低分子量范围内克服了有机基质离子信号的干扰，实现 了对小分子化合物和肽段的分析。大多数酶的底物都为小分子化合物，采用 DIOS．MS技术检测酶催化底物生成的产物，可以监测酶的催化活性。胰蛋白 酶修饰的多孔硅晶片对蛋白的原位酶解和原位肽谱分析提供了一个快速的和 灵敏的工具。在对蛋白细胞色素C和牛血清白蛋白的鉴定上，取得了良好的 序列覆盖度。 亚胺二乙酸衍生的多孔硅表面可以对含有干扰物如尿素和表面活性剂的 蛋白质样品进行预处理，通过清洗其表面，从而实现对蛋白质分子的MALDI 质谱分析。此外，衍生化的多孔硅表面还可以转化为铁离子衍生的多孔硅表 面，能从磷酸化蛋白酶解产物特异性地和选择性地纯化和富集磷酸化肽段。 我们筛选出应用于MALDl分析的新基质3，4．二氨基苯基苯甲酮，新基 质对样品溶液中的污染物如盐酸胍和尿素表现出相对较好的抗干扰能力。此 外，3，4．二氨基苯基苯甲酮在MALDI质谱分析中能有效抑制金属离子的加 和现象。 通过电弧法制备的多壁碳纳米管首次用作MALDI基质，用于代替有机 基质检测样品分子，发展了碳纳米管上的解吸离子化飞行时间质谱技术分析 小分子化合物。在脉冲激光的照射下，碳纳米管充当有机基质吸收能量，然 后传递给样品分子，成功实现了对小肽，药物，糖类化合物和核苷类小分子 化合物的分析。该方法为MALDI质谱在小分子化合物分析中的应用提供了 新的途径。 关键词： 基质辅助激光解吸离子化质谱(MALDIMS)，多孔硅上的解吸离子化质谱 (DIOSMS)，新基质，多孔硅，碳纳米管 Abstract SongyunXu(AnalyticalChemistry) DirectedProf．HanfaZou by BecauseDIOSnlflss littleinterferenceforthe of spectrometrypresenm analysis small inthe tomonitor moleculeslow-massis the range，iteasy digestionproduct formation to ofsubstrate、Ⅳi廿l measureof enzymaticreaction,andthereby activity theimmobilized methodfor erlzyme．Furthermore，apcptide mappinganalysisby in-situ of onthe siliconsurfacemodified digestionproteins porous byenzyme matrix—assistedlaser trypsin,combined、埔tll desorptio／ionizationtime-of-fiight mass hasbeen couldbe spectrometrydeveloped．Goodsequencecoverage obtainedfor CandBSA． ofcytocllfome pr