聚合物包裹纳米磁性微球的制备及对生物物质的吸附影响因素研讨.pdfVIP

摘 要 磁性高分子微球是指内部含有磁性金属或金属氧化物(如铁、钴、镍及其氧 化物)的超细粉末且具有磁响应性的高分子微球。生物磁性高分子微球作为一种 新型的功能材料，因生物磁性高分子微球兼具磁性粒子和聚合物粒子的特性，既 可方便地从介质中分离，又可对其表面进行修饰从而赋予其表面多种官能团，近 ● 1 年来被广泛研究，特别是在生物医学、生物工程等领域的应用引起了各国研究者 ． 的高度重视，成为生物医药研究领域中的一个研究重点。为了充分显示磁性聚合 ’ 。＼ 物微粒迅速、简便的分离特点，微粒本身应具有较高的磁响应性和比表面积。本 文以磁性Fe。04为微球核体制备一系列磁性高分子微球，然后将磁性高分子微球 用于对生物蛋白或核酸进行吸附，考察了影响吸附过程的各种因素。 一、聚丙烯酰胺磁性复合微球的合成及对蛋白质的吸附机理研究 用反相微乳液方法合成聚丙烯酰胺磁性微球，用红外吸收光谱、电子衍射谱、 透射电镜、差动热分析、x．射线粉末衍射等方法对微球进行表征。结果表明微球 内部Fe304晶型保持完好，微球呈球形，微球粒径20nm左右。 将微球用于对蛋白质的磷酸氢二钠．柠檬酸缓冲溶液中的蛋白质进行吸附，再 加入交联剂戊二醛，使得蛋白质特异性吸附在Fe304／PAM微球上。用考马斯亮蓝 、 的影响规律。 二、壳聚糖磁性微球的合成及对蛋白质的吸附机理研究 本文用环氧氯丙烷作为交联剂，将壳聚糖交联包覆在由二价和三价的铁离子 ● 共沉淀制得的Fe304磁子表面上，制成磁性壳聚糖微球(MC)。然后用于吸附蛋白 。 质．磷酸氢二钠．柠檬酸缓冲溶液中的小牛白蛋白，利用红外吸收光谱、透射电镜、 差动热分析、X．射线粉末衍射等方法对微球进行表征。分析微球的形貌、组成及 右。 用紫外分光光度计检测蛋白的吸附量，并讨论了小牛白蛋白(BSA)的初始 2 一 质量浓度、反应体系温度、溶液离子强度、溶液pH以及吸附保温时间对Fe30dMC 微球吸附蛋白质的影响规律。 三、壳聚糖磁性微球对核酸的吸附机理研究 报道了用戊二醛将氨基修饰的寡核苷酸探针固定于氨基磁珠表面制成核酸传 感器，然后进行预杂交、杂交，将传感器与生物素标记的DNA杂交，再利用亲和 素．生物素偶合系统，偶联上亲和素标记的过氧化物磷酸酶，用邻苯二胺显色系统 显色，最后用酶标仪检测磁珠吸附的核酸。同时用紫外分光光度计检测分析了未 反应溶液的吸光度。 考察了吸附过程中探针寡核苷酸的量以及生物素标记的DNA的量对吸附的影 响，找到壳聚糖磁珠吸附核酸的最佳的吸附条件。 本文研究的意义在于找到影响丙烯酰胺磁性微球吸附蛋白过程中的最佳条 件，使得微球表面的蛋白量达到最大，掌握壳聚糖磁性微球对蛋白、核酸的吸附 机理，以及找到壳聚糖表面吸附量达到最大时的适合条件。 关键词：磁性；微球；小牛白蛋白；核酸；吸附 3 Abstract metal whichinclude metalor oxide(such Magneticpolymermicrospheres magnetic asFe、Co、Niandtheir ultrafine and highmageticresponse． oxides)arepowderpossess akindofnovelfunctional itcombinesthe ofboth Itis material，because properties andmacromo