孕鼠肢体缺血预处理对窘迫胎鼠复氧后海马神经元parp-1及aif表达的影响-effects of limb ischemia preconditioning in pregnant rats on parp - 1 and aif expression in hippocampal neurons after reoxygenation in fetal rats.docxVIP

目录中文摘要……………………………………………………………...…1 英文摘要……………………………………………………………...…3 英文缩略语……………………………………………………...5前言……………………………………………………………………...6 材料和方法…………………………………...………………………8 1. 研究对象81.1试验动物…81.2分组92. 方法92.1模型制备92.2实验准备 103. 免疫组化检测123.1实验仪器 12RT-PCR 检测 144.1试验材料 14Western Blot 检测 185.1 实验仪器 18结果…………………………..…………………………………………24 1. 免疫组化 242.RT-PCR…… 262.Western Blot…… 27讨论……………………………………………..………………………29 结论………………………………………………..……………………36 参考文献……………………………………………..…………………37 综述……………………………………….…………………….……43 致谢……………………………………………….…………….………50孕鼠肢体缺血预处理对窘迫胎鼠复氧后海马神经元PARP-1及 AIF表达的影响摘 要目的：探索孕鼠肢体缺血预处理对窘迫胎鼠复氧后海马神经元PARP-1及AIF表达的 影响;寻找在临床应用中如何减轻宫内窘迫胎儿的脑损伤，减少其远期的后 遗症提供一个理论基础和新的思路。方法：按3：1雌雄SD大鼠合笼培养孕鼠，随后将孕19天大鼠腹腔麻醉，剖腹露出 双角子宫；用微动脉夹阻断子宫卵巢动静脉15分钟后开放即建立了宫内窘 迫模型；同时行孕鼠右下肢股动脉阻断5分钟和开放5分钟，共重复3次即建 立了LIP模型。将孕鼠随机分为四组：空白对照组（S）、肢体缺血预处理组（LIP）、胎鼠宫内窘迫组（FD）、LIP+胎鼠宫内窘迫组；于孕21天剖腹取出 胎鼠海马组织；用免疫组化法观察胎鼠海马CA1神经元PARP-1及AIF阳性细 胞数，逆转录PCR法测定胎鼠海马神经元PARP-1及AIF mRNA表达量的变化， 蛋白质印记法测定PARP-1及AIF表达量的变化。结果：1）与 S 组比较， FD 组胎鼠海马 CA1 区神经元 PARP-1 及 AIF 阳性细胞数 增加（P＜0.05），PARP-1 及 AIF mRNA 表达升高（P＜0.05），PARP-1 及 AIF 蛋白表达量增加（P＜0.05）；2）与 S 组比较，LIP 组胎鼠海马 CA1 区神经元 PARP-1 及 AIF 阳性细胞数 无明显变化（P＞0.05），PARP-1 及 AIF mRNA 表达无明显变化（P＞0.05）， PARP-1 及 AIF 蛋白表达量无明显变化（P＞0.05）；3）与 S 组比较，LIP+FD 组胎鼠海马 CA1 区神经元 PARP-1 及 AIF 阳性细胞 数增加（P＜0.05），PARP-1 及 AIF mRNA 表达升高（P＜0.05），PARP-1 及 AIF 蛋白表达量增加（P＜0.05）；4）与 FD 组比较，LIP+FD 组胎鼠海马 CA1 区神经元 PARP-1 及 AIF 阳性细胞 数下降（P＜0.05），PARP-1 及 AIF mRNA 表达减少（P＜0.05），PARP-1 及 AIF 蛋白表达量减少（P＜0.05）。结论：孕鼠缺血预处理能够减少窘迫胎鼠复氧后海马组织PARP-1及AIF的表达量， 从而减少PARP-1依赖性程序性的细胞死亡-Parthanatos。关键词：缺血预处理，多聚ADP核糖聚合酶-1,凋亡诱导因子，胎儿窘迫，海马The Influence of Maternal Limb Ischemic Preconditioning on the Change of PARP-1 and AIF Expression in The Fetal Hippocampal Neurons Induced by Distress-reoxygenation in Pregnant RatsPostgraduate:Zhang Jia-ping Director:ZHENG Xiao-chun ABSTRACTObject: To investigate maternal limb ischemic preconditioning on the change of PARP-1 and AIF expression in the fetal hippocampal neurons caused by distress-reoxygenation in the pregnant rats. looking for h