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HPLC法测定清肝颗粒中小檗碱含量 　　摘要：目的 建立测定清肝颗粒中盐酸小檗碱含量的高效液相色谱法。方法 以Kromasil C18柱（5μm，4.6mm×250mm）为色谱柱，流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾水溶液-磷酸（40:60:0.2），流速为1.0mL/min ，检测波长为350nm。结果 盐酸小檗碱线性范围为0.04125～0.660μg，r=0．9999；平均回收率为99.21％ ，RSD 为1.18％。结论 该方法可靠，灵敏，快速，适合测定清肝颗粒中盐酸小檗碱的含量。? 　　关键词 清肝颗粒 盐酸小檗碱 HPLC?? 　　 　　Determination of Berberine Hydrochloride in Qinggan Granule by HPLC.Liu Chun-di,Liu Xiao-yan,Yu hui.The ZhangJiagang’s hospital of TCM,ZhangJia gang 215600,Jiang Su,China.?? 　　【Abstact】Objective To establish HPLC method for the determination of berberine hydrochloride in Qinggan Granule．Mehod The KromasilCl8(4.6mmX 250mm，5μm)was usedwith acetonitrile― 0．05mol?L～ Potassium dihydrogen phosphate solution―phosphoric acid(40：60:0.2)as a mobile phase．The flow rate was 1．0 mL?min-1．The detecting wavelength was350nm ．Results The linear of berberine hydrochloride was in the range of 0．04125~0．660g，r=0．9999．The average recovery was 99.21％ and RSD was 1.18％.Conclusion Themethod was reliable， sensitive，rapidand suitable for the quality control of berberine hydrochloride in Qinggan Granule．? 　　【Key Words】 Qinggan Granule；berberine hydrochloride； HPLC?? 　　 　　肠易激综合症(Irritable bowel syndrome，IBS)是一种十分常见的慢性、非器质性胃肠功能紊乱症状， 临床以腹痛及大便性状改变为主要表现［1］。该症普通人群患病率较高，清肝颗粒即针对该症，方中以黄连为君药，现代研究表明黄连药效物质基础为黄连生物碱，包括小檗碱（berberine），黄连碱（coptisine），甲基黄连碱（worenine），掌叶防己碱（palmatine）等。其中小檗碱含量最高，小檗碱是中药黄连(Coptis chinensis Franch)中的主要生物碱和药效成分［2］，含量约为7％~9％ ［3］ ，具有抗菌、抗炎、抗血栓、抗溃疡、降血糖等药理作用［4］，故选择小檗碱为含量测定指标，我们参考现行版中国药典一部“左金胶囊”项下小檗碱含量测定方法，采用HPLC法测定本制剂中小檗碱的含量，方法可靠、灵敏、快速。? 　　 　　1 仪器及试药? 　　 　　1.1 仪器 Waters 515泵，Waters 2487紫外-可见检测器，Rheodyne 进样器，中科院大连化学物理所WDL-95色谱工作站。? 　　1.2 试药 盐酸小檗碱（中国药品生物制品检定所，批号：10713-200208，供含量测定用）；乙腈为高效液相色谱纯（美国默克公司生产），磷酸（AR）、磷酸二氢钾（AR），其余试剂均为分析纯。? 　　 　　2 方法与结果? 　　 　　2.1 色谱条件 色谱柱：反相C18柱：Kromasil C18柱（5μm，4.6mm×250mm）；柱温：30℃；流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾水溶液-磷酸（40:60:0.2）；检测器灵敏度：0.5AUFS。流速：1.0mL/min。测定波长：350nm。? 　　2．2 溶液制备? 　　2.2. 1 对照品溶液 精密称取小檗碱对照品1.32mg，加甲醇定容至10ml，配成0.132mg/ml的对照品溶液。? 　　2.2.2 供试品溶液［5］ ① 提取溶媒的考察：精密称取清