TLC结合HPLC法检测保健食品及中成药中掺加化学降糖药物研究.docVIP

TLC结合HPLC法检测保健食品及中成药中掺加化学降糖药物研究 　　文章编号：1008-6919（2007）09-0148-03 中图分类号:R284 文献标识码：A 【医药管理】 　　 　　【摘要】 目的 建立一种检测保健食品及中成药中非法掺加化学降糖药物的筛查方法。 方法采用TLC法对保健食品和中成药非法掺加化学降糖药物进行初步定性，然后用HPLC法进行定性定量分析。结果 本实验建立的条件能够把保健食品及中药制剂中添加的降糖化学药物（格列本脲、格列齐特、格列吡嗪、格列喹酮、格列美脲）同时完全分离开来；对18种制剂用建立的分析技术进行了检测，经与相应的标准物质比较，得到有 8种保健食品和中成药中非法掺有降糖化学药品，1种食品中非法掺入了降糖化学药品。结论 该研究建立的方法具有快速、简便、重复性好、便于操作、灵敏、专属性强等优点。 　　关键词：TLC HPLC 保健食品 中成药 化学降糖药物 　　 　　我国食品和药品市场上出现了在降糖保健食品和中成药添加格列本脲、格列齐特等化学药，面对此类的违法行为，光凭肉眼很难识别，必须通过现代先进技术的检测才能识别，现有单一的薄层色谱法、紫外分光光度法或HPLC法，已很难满足检测的要求，尤其是干扰成分多且量少的情况。虽然现有HPLC-MS法可以解决此类问题，但仪器太昂贵，基层单位很难拥有，故本文作者根据实际需要，建立了TLC结合HPLC法这种专属性强、灵敏度高且基层适用的检测技术，有很大的实际应用意义。 　　 　　1 仪器与试药 　　 　　1.1试药 　　格列本脲对照品（批号：10135-200404），格列齐特对照品（批号：0269-9701），格列吡嗪对照品（批号：100281-0001），格列喹酮对照品（批号：100280-200301），格列美脲对照品（批号：100674-200301）。以上均购自中国药品生物制品检定所。 　　降糖中成药制剂S1，S2，S3，S4，S5、S6，S7 、S8、S9、S10。降糖食品S11，S12，S13，S14，S15、S16，S17 、S18。以上样品均为市售品。 　　甲醇（色谱纯 ）,乙腈（色谱纯 ）,乙酸铵、石油醚（60～90℃）、无水乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷，均为分析纯，硅胶GF254预制板（200×200mm，青岛海浪硅胶干燥剂厂，批 　　1.2仪器Waters高效液相色谱??，Empower色谱工作站，ThermoTM C18柱（250mm×4.6mm,5μm）。ZF-I型三用紫外分析仪，TLC SCANNER3薄层色谱扫描仪（瑞士CAMANG公司）。 　　 　　2 实验方法与结果 　　 　　2.1 薄层色谱鉴别 　　2.1.1对照品溶液的配制分别精密称取格列本脲、格列齐特、格列吡嗪、格列喹酮、格列美脲对照品各约5 mg，加三氯甲烷5 ml使其溶解，备用。 　　2.1.2样品溶液的配制分别取各样品的一次口服剂量，研细，分别置100 ml锥型瓶中，各加三氯甲烷30 ml，超声30分钟，滤过，蒸干，残渣加三氯甲烷1 ml使其溶解，备用。 　　2.1.3 薄层板：硅胶GF254预制板（200×200mm，青岛海浪硅胶干燥剂厂，批厚0.3mm）临用前110 ℃活化30分钟。 　　2.1.4点样量：取上述溶液各5μl。 　　2.1.5展开剂：石油醚-乙酸乙酯-三氯甲烷-无水乙醇-甲酸（10：5：2：1：0.1）。 　　2.1.6展开方式：预饱和15分钟，上行展开，展距：18cm，温度：：22 ℃, 相对湿度：75%。 　　2.2结果 　　2.2.1薄层检识结果 取出，晾干，置紫外灯254nm下，检识，得到保健食品S12和中成药S6，S8的色谱图中在与格列本脲和格列齐特对照品相应的位置上显相同的斑点；保健食品S17的色谱图中在与格列美脲和格列齐特对照品相应的位置上显相同的斑点；保健食品S13，S15、S18和中成药S5，S7的色谱图中在与格列本脲对照品相应的位置上显相同的斑点，具体图谱见图1。 　　 　　图1 （从左到右编号） 1-格列本脲对照品 2-格列吡嗪对照品 3-格列喹酮对照品 4-格列美脲对照品 5-格列齐特对照品6,7-混合对照品8-样品S13 9-样品S15 10-样品S18 11-样品S1712-样品S12 13-样品S6 14-样品S8 　　Fig 1 1- Glibenclamide,2- Glipizide3- Gliquidone4- Glimepiride5- Gliclazide 6,7-the mixture 8- the sample S13 9- the sample S1510- the sample S1311-