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β-环糊精包合五味子挥发油工艺研究 　　摘要 目的：研究β-环糊精超声法包合五味子挥发油的最佳工艺。方法：超声法包合工艺，正交实验法，考察挥发油利用率、包合物收得率2个指标。结果：优选出包合工艺是挥发油：β-环糊精为1：4，包合温度为40℃，包合时间40min。结论：该方法操作简便，包合率较高，适合于工业化生产。 　　关键词 五味子挥发油 β-环糊精包合物 正交设计 超声法 　　 　　本研究以β-环糊精(β-CD)为主体，五味子挥发油为客体，采用超声法进行包合试验，通过挥发油利用率、包合物收得率、包合物含油率的比较，筛选出最佳工艺，对五味子挥发油的β-CD包合进行进一步探索。 　　 　　1　仪器与试药 　　 　　1　仪器：Lambda12紫外分光光度计，美国帕金一埃尔默公司；KQ_500DE数控超声波清洗器，昆山超声仪器有限公司；DZF-6020型真空干燥箱，上海精宏实验设备有限公司；可控硅控温水浴锅，上海锦屏仪器仪表有限公司；SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵，巩义市英峪予华仪器厂；调温器(500ml)，上海浦东新区电理仪器厂；SXHW型电热套，巩义市英峪仪器一厂。 　　 　　1.2　试剂：五味子：购自浙江中医学院中药饮片厂，产地辽宁，批号051109；β-CD：广东省郁南县环状糊精厂；硅胶G：青岛海洋化工厂。其他所用试剂均为分析纯。 　　 　　2　方法与结果 　　 　　2.1　挥发油的提取：取五味子粉末150g，加10倍量水，浸泡分别为0h，2h，4h，按《中国药典》2005年版附录XD挥发油测定法(甲法)提取挥发油，分别读取1～9 h的挥发油提取量，结果表明：8h后挥发油提取量不再增加，且浸泡时间对挥发油提取量没有明显影响。 　　 　　因此，我们确定挥发油提取条件为：10倍量的水加热，保持微沸7h，用水蒸气蒸馏法提取挥发油。并测得20℃下提取得到的挥发油的相对密度为0.863g/ml。 　　 　　2.2　挥发油β-CD包合工艺的研究：分包合物的制备方法、正交试验设计、包合物挥发油利用率测定三个方面，阐述如下。 　　2.2.1　包合物的制备方法：称取一定量的β-CD于具塞锥形瓶中，加入适量的蒸馏水，于水浴中溶解至澄清。放入超声波清洗器中，将用2倍量无水乙醇稀释过的五味子挥??油，滴加至具塞锥形瓶，边超声边缓慢滴加，滴完后超声至规定时间(因素水平条件见表2)。取出，放冷，置冰箱2℃冷藏。24h后，抽滤，抽至近千，用少量石油醚洗涤，抽干。置50℃真空干燥箱内干燥3h，即得粉末状的五味子挥发油β-CD包合物，精密称重。 　　 　　2.2.2　正交试验设计：为了寻找五味子挥发油的最佳包合条件，确定五味子挥发油与β-CD比例(A)、包合温度(B)、包合时间(C)3个因素，分别设计3个水平，进行L9(34)正交试验，以五味子挥发油的利用率、包合物收得率、包合物的含油率为指标进行考查，按照设计，共进行了9组实验。置500 m1圆底烧瓶中，加蒸馏水300 ml和沸石少许，按《中国药典》2005年版附录XD挥发油测定法(甲法)测定包合物中实际挥发油含量。同时进行挥发油空白回收率测定，即用1 ml移液管移取1ml挥发油置500ml圆底烧瓶中，加300ml水，加热，保持微沸5h，提取至挥发油量不再增加，停止加热，静置1h，读取挥发油量。计算挥发油提取回收率。结果回收率为90.0％。 　　在测定挥发油含量及空白回收率基础上计算挥发油利用率、包合物收得率、包合物含油率。计算公式如下：挥发油利用率一包合物中实际含油量(ml)/挥发油投入量(ml)×空白回收率×100％；空白回收率=回收挥发油量(ml)/加入挥发油量(m1)×100％；包合物收得率一包合物实际重量(g)/(β-CD+投油量)(g)×100％。 　　实验结果表明：最佳包合条件为40℃、包合40min、五味子油：β-CD比例为1：4。方差分析表明，各因素对实验结果没有显著性影响。 　　 　　2.3 包合物的验证：分紫外扫描检查与薄层层析法检查包合物的质量2个方面，阐述如下。 　　2.3.1　紫外扫描检查包合物的质量：供试液的制备：分别取适量五味子挥发油、五味子回收油及五味子挥发油β-CD包合物，用一定量的无水乙醇进行稀释，于200～350nm紫外分光光度计下进行扫描。 　　紫外扫描图谱表明：五味子挥发油、回收后五味子挥发油均有紫外吸收，且挥发油包合前后其最大吸收波长一致，而β-CD却无紫外吸收，可见包合物形成，且包合前后挥发油成分无变化。 　　2.3.2　薄层层析法(TLC)检查包合物质量：挥发油供试液的制备：分别取0.5ml的五味子挥发油、回收后的五味子挥发油于5ml容量瓶中用无水乙醇定容，得供试液。D―CD、p―CD包合物供试液的制