不同工艺对茵栀黄注射液质量影响.docVIP

不同工艺对茵栀黄注射液质量影响 　　【摘要】目的：对不同工艺茵栀黄注射液质量进行研究。方法：以黄芩苷含量、鞣质检查、澄明度为主要指标，对不同工艺的茵栀黄注射液进行质量考察。结果：工艺对质量的影响较大，其中茵陈提取总黄酮，水提醇沉制得金银花提取物，配液后进行超滤或者加壳聚糖澄清，这两种工艺较好且稳定可控。结论：两种工艺均可用于茵栀黄注射液的质量改进，是有效的方法，其中加壳聚糖澄清改进工艺的茵栀黄注射液效果同于超滤，且成本低，且工艺简单，有利于大规模生产。 　　【关键词】茵栀黄注射液；工艺考察；质量；药效学 　　 　　茵栀黄注射液收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十四册，处方由茵陈提取物，栀子提取物，金银花提取物，黄芩苷组成。主要有效成分为：蒿属香豆素滨蒿内酯、绿原酸、对羟基苯乙酮、环烯醚萜类物质栀子苷和京尼平苷、黄芩苷、茵 陈 色酮等各种色酮。具有退黄疸、降低谷丙转氨酶、解痉利胆、抗病原微生物及利尿的作用。[1] 　　临床报道茵栀黄注射液有时有一定的不良反应，其原因之一是茵栀黄注射液制备工艺比较简单，没有除尽鞣质以及相关大分子。所以茵栀黄注射液工艺改进尤为必要。[4] 　　1实验材料 　　1.1药品及主要试剂 　　药品黄芩苷标准品（购自中国药品生物制品检定所，批号为715-8501），供含量测定用。 　　试剂甲醇为色谱甲醇，水为重蒸馏水，其它均为分析纯，葡萄糖，葡甲胺。GOT、GPT试剂盒（南京建成科技有限公司）, 0.1 % CCl4的大豆油溶液，0.9 %的NaCl溶液（用于稀释注射液浓度为原来的1/5）。[3] 　　1.2主要仪器 Waters 600E-2487型高效液相色谱仪、Millennium32色谱工作站数据处理系统，均为美国产，分析天平：十万分之一（湘仪天平仪器厂）， 　　756型 紫外?可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司），高速冷冻离心机（科大创新股份有限公司中佳分公司），MILLIPORE 10kd超滤管，3号垂熔玻 璃器漏斗（由黑龙江中医药大学附属第一医院药物制剂科提供）。 　　2注射液不同制备工艺 　　2.1工艺一（部颁标准工艺） 　　2.1.1提取工艺 　　黄芩甙的制备：将黄芩的水提液部分浓缩，用盐酸调节pH值至1.0～2.0,80℃保温，静置，滤过，沉淀物加适量水搅匀，用40%氢氧化钠溶液调节pH值至7.0，加入适量活性炭，充分搅拌，加1倍量乙醇加热搅匀，趁热滤过，滤液用盐酸调pH至2.0,60℃保温，静置，滤过，沉淀用少量乙醇洗涤后，于60℃以下真空干燥，得黄芩苷，经高效液相色谱法测定黄芩苷含量达到92.7% 　　 （以下配液工艺均用此黄芩苷）。 　　茵陈提取物：由茵陈药材用90％乙醇渗漉后水沉去杂制得。栀子提取物：栀子药材用70％的乙醇回流后再用95％乙醇沉淀制得。金银花提取物：由金银花药材经水提，石硫醇法去杂制得。 　　2.1.2配液工艺 　　以上四味（茵陈提取物6g， 栀子提取物，3.2g，黄芩甙 20g，金银花提取物-以绿原酸计-4g），取黄芩甙加水适量润湿，用氢氧化钠溶液溶解；其余茵陈提取物等三味分别加水溶解，另取葡萄糖20g，葡甲胺5g加水溶解，混匀，调节pH值,以注射用水稀释至1000ml，粗滤，过G3滤球，灌封，灭菌，即得。 　　2.2 工艺二 　　（1）茵陈提取物：以总黄酮含量为指标，经正交试验优化，确定为加10倍量70%乙醇，回流3次，每次1.5小时。合并提取液并浓缩至膏状，然后加10倍量蒸馏水沉淀，过滤后减压浓缩、干燥得茵陈提取物。（2）栀子提取物：同工艺一。（3）金银花提取物：由金银花药材经水提醇沉制得。 　　配液后，粗滤，过G3滤球精滤，然后用分子量为10kd的聚砜膜超滤，灌封，灭菌即得。 　　2.3工艺三 　　提取同工艺二；配液后，粗滤，然后过G3滤球精滤，滤液加适量0.5%的壳聚糖水溶液（经反复试验后，确定加入量为5%）澄清，离心后，取上清液，减压浓缩到原来体积，灌封，灭菌即得。 　　2.4工艺四 　　茵陈和栀子用量按部颁标准的出膏率折算成药材，金银花和黄芩按药材中绿原酸和黄芩苷含量折算，四味药材混合后，水提醇（75%）沉，过滤，减压浓缩至无醇味，按部颁标准配液工艺配液后，粗滤，过G3滤球精滤，然后用分子量为10kd的聚砜膜超滤，灌封，灭菌即得。 　　2.5工艺五 　　混合提取同工艺四。按部颁标准工艺配液后，粗滤，过G3精滤，然后加0.5%的壳聚糖水溶液适量（经反复试验后，确定加入量为5%）澄清，离心后，取上清液，减压浓缩到原来体积，灌封，灭菌即得。 　　3不同工艺对质量的影响 　　3.1黄芩苷含量的测定 　　3.1.1色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18柱（4.6×250mm，5micro;m