石墨烯及信号放大技能在光分析法检测生物活性物质中的应用.pdfVIP

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2018-06-03 发布于贵州
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石墨烯及信号放大技能在光分析法检测生物活性物质中的应用.pdf

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石墨烯及信号放大技能在光分析法检测生物活性物质中的应用

的研究设计了一种新颖的杂交链式反应．滚环复制放大技术(HCR．BRCA)，采用化学发光方法检测DNA甲基化酶的活性。实验分为三个阶段：1)甲基化及DNA 成环过程：首先，两条互补的ssDNA杂交，加入DNA甲基转移酶以及具有相同 I限制性内切酶，在修饰上甲基的识别位点之间将DNA链切开，识别位点的Dpn 分别得到两条长短不一的ssDNA。然后放入一条可与长链DNA链互补的DNA 引物DNAPI、DNA P2(其末端含氨基与磁珠结合)并将末端磷酸化，加入T4连下引发滚环复制，并引入与DNA链互补的两条可发生杂交链式反应的引物DNA H1、DNA H2，末端含生物素。3)化学发光检测过程：磁性分离留磁珠，加入亲测。该体系对DNA甲基化酶的检测限可达到到0．52U／mL。关键词：氧化石墨烯信号放大技术凝血酶谷胱甘肽DNA甲基化 ANDSIGNAL APPLICATl0NOFGRAPHENE ANALYSIS AⅣ口LIFICATl0NTECHNOLOGYIN0PTICAL T0DETECT1’HEBIOACTIVESUBSTANCES Ⅳ匝THOD ABSTRACT is a materialwiththelatticestructureof nanophase monolayer Graphene two-dimensional hasbeen wideattentionforits honeycomb．Itpaid uniquephysical andchemical isconvenientand in properties．Opticalanalysis practicaloperation， with and the the aswellasthe highsensitivityselectivity．Inthesis，throughgraphene combinationof with achieved opticalanalysissignalamplificationtechnology，we’ve the detectionof highly-sensitiveDNA，Thrombin，Glutathione，DNAmethylase．Our workwasconducted tothe three mainlyaccordingfollowingaspects． 1．TheResearchaboutthedetectionDNAandthrombinbasedonthe oxidechemiluminescenceresonance Luminol··H202··HRP-·fluorescein··graphene energy transfer system A to DNAand newChemiluminescencebiosensordetectthe of sensitivity Thrombinwasinventedbasedonthe