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第四章 发酵工业培养基及原料处理 培养基的营养、组成和原料处理 第二节 工业发酵中营养基质的种类 一、不同原料纯度的培养基 按照预料化学纯度的不同可以将发酵培养基分成天然培养基、合成培养基和半合成培养基三种。 天然培养基 (undefined medium) 是指采用一些化学成分不清楚或化学成分不恒定的物质作为原料的培养基。 常见供体:很多有机碳(氮)源物质,如各种工农业下脚料的水解液及其干粉 优点:取材方便、营养丰富、价格低廉,广谱 一、不同原料纯度的培养基 缺点:成分不明确,质量不稳定 应用:发酵工业 合成培养基 (defined medium) 即指用各种成分明确、稳定的化学试剂配制的培养基。 常见供体:常见于实验室,如高氏一号培养基 优点:成分含量明确,能定量 缺点:营养单一,价格较高,不广谱 应用:实验室研究及特殊发酵工业 一、不同原料纯度的培养基 半合成培养基 (semi-defined medium) 指既含有天然成分,又含有纯化学试剂的培养基。 常见供体:如PDA培养基 优缺点:介于前两者之间,实际发酵培养基严格说都属半合成培养基。 二、物理状态不同的培养基 按照发酵培养基的物理状态的不同可以分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。 固体培养基 (solid medium) 即外形呈固体的培养基。 应用: 实验室的菌种分离、纯化、鉴别、鉴定、保藏等工作,一般指以琼脂作凝固剂的培养基。 由各种天然固体基质制成的固体培养基,如各种曲。 由血清或硅胶配制成的特殊培养基。 滤膜培养基,生物膜。 二、物理状态不同的培养基 液体培养基 (liquid medium) 即外形呈液体的培养基。 优点:其液体状态对发酵生产有很多便利。 应用:广泛,且是未来发酵工业的趋势。 半固体培养基 (semi-solid medium) 即外形呈半固体的培养基。 特点:凝固剂含量低,呈胶冻状。 应用:细菌运动性观察、噬菌体效价测定、厌氧菌培养和保藏等 三、用途不同的培养基 实验室用培养基 选择培养基 (selected medium) 是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某种物理化学因素的抗性而设计的用于富集的培养基。 特点:投其所好,取其所抗 应用:富集某种微生物,如富集自生固氮菌的阿贝氏无氮培养基,富集土壤真菌的马丁氏培养基等。 三、用途不同的培养基 鉴别培养基 (differential medium) 是一种在培养基中加入一种与待测菌的某种无色代谢物发生显色反应的指示剂,从而在适当的培养后用肉眼即可分辨出待测菌的培养基。 应用:如在饮用水、牛乳等的细菌学检验中经常用到的鉴别肠道细菌及致病菌的伊红美蓝培养基 (Eosin Methylene Blue, EMB)、VP试验和甲基红实验及其它鉴别培养基等。 三、用途不同的培养基 生产用培养基 孢子培养基 促使菌种产孢子的培养基。 特点 营养粗放 多用天然基质 最佳配方需试验确定 三、用途不同的培养基 种子培养基 是供孢子发芽生长出大量菌丝体,或不产孢子的菌种繁殖出大量细胞的培养基。 特点 营养更丰富 氮源含量更高,搭配合理 成分配比上向发酵培养基靠拢 三、用途不同的培养基 发酵培养基 是供菌种生长繁殖和合成发酵产物的培养基。 特点:成分比较复杂,含有一些非营养物质。 由于发酵培养基既要能保证接种的种子的生长繁殖,又要保证发酵产物的合成,所以其中除含有通常培养基所含的必需营养元素外,还含有前体、产物促进剂和抑制剂以及指示剂、消泡剂等物质。 第三节 工业发酵中营养基质的选择 一、营养基质的选择 难点: 培养基组分情况 培养基配制加工过程情况 微生物情况 目前做法: 理论指导 前人经验 结合实际情况 按照一定的实验方法和步骤 一、营养基质的选择 营养基质的种类 菌种 实验室/发酵生产 具体用途 工艺、产品等其它相关因素 基质原材料的质量问题 产地 加工、储藏、运输 预处理 一、营养基质的选择 营养基质选择的经济原则 以粗代精等 二、培养基成分用量的确定 参考不同微生物细胞元素比例确定 不同微生物各有特点 不同微生物的共性 参照碳氮比 (C/N)确定 概念:碳氮比指的是培养基碳源中的碳原子摩尔数与氮源中的氮原子摩尔数之比。 影响:碳氮比 (C/N)高意味着碳源过多,容易使氧化不彻底,形成较多的有机酸,培养基pH值会偏酸; 二、培养基成分用量的确定 碳氮比 (C/N)低意味着氮源相对过多,则一般会使培养基pH值偏碱。 确定:不同微生物,或不同生理状态以及不同的生产要求均不同,所以最适的碳氮比 (C/N)要通过实验确定,一般在1
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