早期宫颈癌外周血MAGEA3和hSTC1mRNA检测及意义.docVIP

早期宫颈癌外周血MAGEA3和hSTC1mRNA检测及意义 　　[摘要] 目的 研究早期宫颈癌患者外周血中MAGEA3和hSTC1 mRNA的表达及临床意义。方法 采用RT-PCR法检测60例ⅠA~ⅡA期宫颈癌患者及15例同期入院的排除其他恶性肿瘤的子宫肌瘤患者外周血中MAGEA3和hSTC1 mRNA的表达，并分析其与临床病理因素之间的关系。结果 60例早期宫颈癌患者外周血中MAGEA3和hSTC1 mRNA的阳性表达率分别为46.67%（28/60）和40%（24/60），子宫肿瘤均为0%。MAGEA3和hSTC1 mRNA的单独阳性表达率和双阳性表达率除与淋巴结转移和脉管瘤栓显著相关外（P＜0.05），与宫颈癌的预后因素如年龄、分期、分化、组织类型、肿瘤大小均无关（P＞0.05），但随着肿瘤分期及肌层浸润深度的增加有逐步上升的趋势。结论 MAGEA3和hSTC1可作为检测早期宫颈癌外周血微转移的生物学指标，但对预后的意义有待于进一步研究。 　　[关键词] 宫颈癌；MAGEA3 mRNA；hSTC1 mRNA；外周血；RT-PCR 　　[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2009）12-13-03 　　 　　Detection of MAGEA3 mRNA and hSTC1 mRNA in Peripheral Blood of Patients with Early Stage Cervical Cancer and Its Clinical Significance 　　ZHAO XinlingLU AiniLIAO Yumei 　　Department of Gynecology，Second Hospital，Zhengzhou University，Zhengzhou 450000 　　 　　[Abstract] Objective To study the expression of MAGEA3 and hSTC1 mRNA in peripheral blood of patients with FIGO Stage IA to IIA cervical cancer and to investigate its clinical significance. Methods Using the reverse transcription polymerase chain reaction（RT-PCR），MAGEA3 and hSTC1 mRNA expression was examined in peripheral blood from 60 patients with early cervical cancer before operation. As control，15 patients with uterine myoma were also investigated. Results The positive rate for MAGEA3 and hSTC1 mRNA expression were 46.7%（28/60） and 40%（24/60） in 40 cervical cancer respectively，0% and 0% in uterine myoma. The expression of MAGEA3 or hSTC1 mRNA were significantly associated with lymph node metastasis and lymphvascular involvement（P 3，淋巴结取肉眼观可疑癌转移者，沿纵轴剖开，标号后一半送病理，一半留用（术后病理确诊为癌转移）。组织置RNA Guard，4℃冰箱过夜，-80℃保存备用。Trizol法提取细胞和组织的总RNA，1.2%的琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性，紫外分光光度仪??量，判断RNA纯度，要求OD260/OD280＞1.8。 　　1.3.2RT-PCR按Fermentas的逆转录试剂盒说明书将每例标本的总RNA反转录成cDNA，-20℃保存备用。PCR反应条件：94℃ 3min，94℃ 30s，57℃（MAGEA3）/53℃（hSTC1） 30s，72℃ 1min，共35个循环。PCR产物6μl，2%琼脂糖凝胶电泳90v，40min，紫外透射反射仪下拍照记录并分析结果。结果判定：154bp（β-actin），243bp（hSTC1），327bp（MAGEA3）。 　　1.3.3统计学处理用Excel软件收集数据并建立数据库，计数资料采用率表示，SPSS16.0软件包进行统计处理。各组间率的比较用x2检验。