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实验一普通光学显微镜的使用 - 微生物实验
微生物实验 合肥工业大学生物与食品工程学院 微生物学实验室规则 一、进实验室前必须身穿实验用白大褂,不得穿短裤、拖鞋,女生上课必须将长发扎起。非必要物品禁止带人室内。 二、按规定座次入座,按规定镜号取用显微镜。 三、室内保持安静,不许高声说话、谈笑,避免不必要的走动。严禁随地吐痰,严禁在室内吸烟。 四、实验课前必须充分预习实验内容。实验过程中,要及时记录实验现象与结果。 五、用完显微镜后应仔细检查,保持镜身洁净、干燥,使用油镜头后务必将油拭净。 微生物学实验室规则 六、实验中需要培养的材料应写好标签,注明组别、姓名、实验日期等,并放到指定地点进行培养。 七、从培养箱或冰箱中取放物品时应随手关门。 八、对试剂等耗材要力求节约,用毕后仍放回原处。损坏玻璃器皿要赔偿。 九、实验结束,要及时整理擦净台面。值日生要扫净地面,关好水、电、门、窗后再离开实验室。 目 录 实验一 普通光学显微镜的使用 实验二 细菌形态和结构观察(Ⅰ) 实验三 细菌形态和结构观察(Ⅱ) 实验四 放线菌形态结构观察 实验五 酵母菌形态结构观察及测微技术 实验六 霉菌形态结构观察 实验七 培养基的制备和常用器皿的准备 实验八 土壤中细菌、放线菌、酵母菌及霉菌的分离与纯化 实验九 环境因素对微生物生长的影响 实验十 细菌生化实验 实验十一 微生物生长测定 实验十二 牛乳中细菌的检查 实 验 一 普通光学显微镜的使用 一、实验目的 1、了解普通光学显微镜的构造、各部分的功能及使用方法。 2、掌握普通光学显微镜,重点是油镜的正确使用方法。 二、实验原理 显微镜的分辨率 分辨率=λ/2NA= λ/2 n·sinθ n:介质折射率 θ :光线镜口角的半数 三、实验材料 1、菌种:自制涂片。 2、溶液或试剂:香柏油、洗液(30%乙醇+70%乙醚)。 3、仪器或其他用具:普通光学显微镜、擦镜纸等。 四、实验步骤 1、观察前的准备: 2、显微观察: 3、显微镜用后处理。 五、注意事项 1、取放显微镜一手拖底座,一手握镜臂。 2、观察时双眼睁开。 3、观察顺序:低倍镜→高倍镜→油镜 六、实验报告 1、分别绘出你在低倍镜、高倍镜和油镜下观察到的枯草芽孢杆菌简单染色后的形态,同时注明物镜放大倍数和总放大率。 2、影响显微镜分辨率的因素有哪些? * * (验证) (验证) (验证) (验证) (验证) (验证) (验证) (综合) (验证) (验证) (验证) (综合) 机械装置 光学装置 聚光器 聚光器透镜 虹彩光圈 升降螺旋 物镜上数字意义: 160:镜筒长度 40:物镜放大倍数 0.65:数值孔径 0.17:要求盖玻片的厚度 显微镜的放大倍数:物镜放大倍数×目镜放大倍数 图1.1.2 物镜的镜口角 1-物镜 2-镜口角 3-标本面 提高分辨率 增加视野的照明度 显微镜的放置 显微镜的调节 光源调节 瞳距调节 观察顺序:低倍镜→高倍镜→油镜 下降载物台→放置染色标本并置于物镜正下方→下降10倍物镜→粗调升起镜筒→使用推进器找到目标→认真观察→40倍物镜转入光路→利用微调调节→观察→物镜转出光路→滴加镜油→油镜转入光路→利用微调调节→观察 上升镜筒,取下载玻片→擦洗油镜(三遍:擦镜纸→蘸有洗液的擦镜纸→擦镜纸)各部分还原(物镜呈“八”字形放置) *
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