毛细管液相色谱高效电脉微分离方法研讨.pdfVIP

墨兰查兰翌圭兰竺竺查—— 摘要 一——————一 选择毛细管液相色谱／高效电泳微分离方法为本论文的主攻方向。系统深 入地探索了耋!堕量商熬超相一色谱(HPLC)一妻塑曼电鲞(cE)三堂坌妻方迭，以及 相关的柱制备新技术，快速胶束电动色谱(MEKC)方法。将所发展的新技术和方 法应用于中药复杂体系样品和蛋白质等生物样咬的岔析，证明了方法的超强分 离能力和潜在的应用价值。 f论文第一章针对国际上色谱、电泳等分离技术研究微型化、高分离能力的 ＼ 发展趋势，总结了该领域相关的研究工作。详述了高效微分离方法，包括毛细 管气相色谱、微柱HPLC、cE及微芯片分离技术等。介绍了多维分离方法学的研 究基础，并重点评述了HPLC—CE二雏联用技术。 第二章全面探讨了建立毛细管高效液相色谱一毛细管电泳二维分离系统方 法学的研究及相关的柱制备技术、快速胶束电动色谱理论等问题。研制了一步 frit)新方法。首次制备出 溶胶一凝胶法制备毛细管HPLC柱上塞子(On—COlumn M 了耐500ba HCl和0．1NaOH的 r装填压力的塞子，而且通透性好，通过0．IM 极端P}I测试，化学稳定性好。由此制备的毛细管柱塔板高度在l3—20¨m之间，。 发展完善了快速胶束电动色谱(MEKC)理论，建立了单位时间内的柱效(N／t)与 场强、柱长关系的理论模型。研究表明，保持一定的柱长，并提高电压，是实 现快速MEKC的最佳途径。在上述基础上，首次建立了接触式脉冲切换进样二维 分离系统。接口以两根毛细管柱的短暂脉冲接触实现进样，进样频率、进样时 间和时序经选择优化后，进样效率高达81％，迁移时间、峰高的相对标准偏差 (RSD％)平均值为1．8％、3．O％。 第三章集中探讨了高效微分离方法在中药、蛋白质、核酸等复杂体系样品 分离中的应用。第一次用毛细管HPLC—MEKC二维联用技术分离了甘草提取物中 的11 0种纽分，复方小承气汤中的250余种组分。证明了该方法将有重要的学 术价值和应用前景。运用毛细管tlPLC柱对蛋白质样品的分离结果优于常规ItPLC 柱，为蛋白质组学研究提供了强有力的支持。论文最后还探索了线性聚丙烯酰 胺毛细管凝胶电泳(CGE)方法，分离效能高达106／m，20次重复进样RSD％小于 4％，初步应用于人工合成的寡聚核苷酸片段分离、纯度鉴定。卜 ， ～—— 一～兰兰查兰竺圭兰兰兰查 一 ——————————————————————一————————————一 ABSTRACT at a two—dimensional aims system thesis The developingcomprehensive in liquid highperformance capillary coupling methodsfor capillary electrophoresis(CE)．Meanwhile，related capillary column and m／cellarelctrokinetic