应用微生物和发酵工程试题.docVIP

应用微生物与发酵工程试题       一、发酵工程的概念，基本内容，基本特点。 发酵工程：是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。或发酵工程是指在最适发酵条件下，发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的技术。 基本内容：包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 基本特点：(l)不完全依赖地球卜的有限资源，而着眼于再生资源的利用，不受原料的限制(2)生物反应所需的温度较低，生产步骤简化，实行生产过程的连续性，大大节约能源，缩短生产周期，降低成本，减少对环境的污染(3)可开辟一条安全有效、生产价格低廉、纯净的生物制品的新途径(4)能解决传统技术或常规方法所不能解决的许多重大难题，并为能源、环境保护提供新的解决办法.(5)可定向创造新品种、新物种，适应多方面的需要，造福于人类.(6)投资小，收益大，见效快. 发酵工程的另一个基本特点：发酵技术的放大方面，则需要由小试放大到中试逐步进行探讨。实验室进行的小规模发酵所获得的最适条件的各种参数，能否在工业规模生产中也同样保证其最适条件，那就是不是轻而易举的事了。 二、生物化学工程的基本内容，（上，中，下游）。     生物化学工程由三部分组成：上游工程，发酵过程和下游工程。   上游工程：包括优良种株的选育，最适发酵条件（pH、温度、溶氧和营养组成）的确定，营养物的准备等；   发酵过程（发酵工艺）：主要指在最适发酵条件下，发酵罐中大量培养细胞和生产代谢产物的工艺技术；   下游工程：指从发酵液中分离和纯化产品的技术：包括固液分离技术（离心分离，过滤分离，沉淀分离等工艺），细胞破壁技术（超声、高压剪切、渗透压、表面活性剂和溶壁酶等），蛋白质纯化技术（沉淀法、色谱分离法和超滤法等），最后还有产品的包装处理技术（真空干燥和冰冻干事燥等）。            三、微生物菌种选育有哪些方法，优缺点。 1. 生产中选育：利用微生物自然突变进行的菌种选育。 优点：简单易行，可与生产同步进行。 缺点：频率低，10-8—10-9 /次分裂。 2.诱变选育：诱导微生物发生突变进行的菌种选育，包括诱变和筛选两个步骤。             优点：提高突变率，产生新基因，为菌种选育提供更多原始材料，缩短育种年限。             缺点：盲目性大，且突变大多是有害的，需处理大量样本。 3.杂交育种：借助有性重组，使不同菌株的遗传物质得以交换（获优良性状集中的重组体）。             优点：能根据人的预见把位于两个生物体上的优良性状集于一身。 缺点：时间长，需及时发现优良性状。 4.原生质体融合育种：借助原生质融合技术实现遗传物质的交换 优点：受限制小；重组频率高；遗传物质传递更充分；可先用理化因子处理；              其诱变率更高。 缺点：技术复杂，难度大；它将对生物多样性提出挑战，有性繁殖是形成生物多样性的重要基础，而“克隆动物”则会导致生物品系减少，个体生存能力下降。 5.基因工程育种：定向育种，技术 含量高，应用面广               优点：缩短育种年限，目的性强，克服远缘杂交不亲合的障碍。 缺点：技术条件高 四、菌种改良的基本途径有那些。 广义上说,菌种改良可描述为采用任何科学技术手段(物理、化学、生物学、工程学方法以及它们的各种组合)处理微生物菌种,从中分离得到能显示所要求表型的变异菌种。 菌种改良的基本途径:突变和选择;基因重组(遗传重组)和基因工程(遗传工程)。 2.1　传统的(“经典的”)诱变及筛选是最常用的菌种改良手段。关键的第一步是用物理、化学或生物 的诱变因子修改目的微生物的基因组(genome),产生突变型。微生物的自发突变频率在10-5~10-8之间,经诱变剂处理微生物细胞后,可大幅度提高突变频率,达到10-3~10-6,这比自发突变提高了上百倍。 2.2　基因重组(遗传重组)是菌种改良的另一重要途径 　　凡采用杂交、接合、转化和转导等遗传学方法,把两个不同形状个体内的基因放在一起,经遗传交换(crossing over),重新组合后,改变遗传结构,形成新的遗传型个体的过程,称为基因重组或遗传重组。通过这种手段,增加优良性状的组合,或者导致多倍体的出现,从而获得性能优良的生产菌种,在工业微生物育种工作中占有重要地位。但是由于若干重要工业微生物的杂交、有性世代等尚未揭示,(如柠檬酸产生菌黑曲霉等有性生殖世代尚未发现),在很大程度上妨碍了杂交手段的实际应用。因此,与诱变育种相比,杂交育种的研究报导数量相对较少。 2.3　基因工程是工业菌种改良最具魅力、最有潜力的技术 基因工程也称遗传工程、重组DNA技术,是现代生物技术的核心