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超声法提取猪苓总多糖工艺研究
超声法提取猪苓总多糖工艺研究
[摘要] 目的:优选猪苓总多糖的最佳提取工艺。方法:采用苯酚-硫酸法测定总多糖的含量,以猪苓总多糖的含量为考察指标,对超声法提取猪苓多糖进行了优化研究。结果:最佳提取工艺为取猪苓饮片用14倍量的水超声提取3次,每次20 min,浓缩液的醇沉浓度为85%。结论:优选的工艺提取率高,稳定可行。
[关键词] 猪苓总多糖;超声提取;苯酚-硫酸法
[中图分类号]R284.2 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2008)04(b)-051-02
Study on the ultrasound extraction process of crude polycose in Polyporus umbellatus (Pers.) Fries
HE Si-huang
(Guangdong Food and Drug Vocational College, Guangzhou 510520, China)
[Abstract] Objective: To optimize the ultrasound extraction process of crude polycose in Polyporus umbellatus (Pers.) Fries. Methods: Using the content of polycose detected by the phenol-sulphuric acid method as the index to study the best extraction process. Results: The best process was that extracting for 3 timesusing 14 times water,and 20 min for each time. Conclusion: The extracting rate is high,and the process is stable.
[Key words] Polyporus umbellatus(Pers.) Fries; Ultrasound extraction process; Phenol- sulphuric acid method
猪苓为多孔菌科真菌猪苓Polyporus umbellatus (Pers.) Fries的干燥菌核,具有利水渗湿的功效,现代药理研究证明,猪苓多糖对人体免疫力和肝脏功能均有影响,还具有抗肿瘤的作用[1]。目前对猪苓总多糖的提取工艺研究报道很少,本实验以总多糖含量为指标,对超声法提取猪苓多糖进行了优化研究。
1 仪器与试药
754紫外可见光分光光度计(上海精密分析仪器厂);WH-90A旋涡混合仪(上海振荣科学仪器公司);6%苯酚(临时配制);葡萄糖标准品(购自中国药品生物制品检验所)。猪苓药材经鉴定为猪苓Polyporus umbellatus(Pers.) Fries的干燥茎。
2 方法与结果
2.1 猪苓多糖的含量测定[2]
2.1.1 对照品溶液的制备取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖标准品29.12 mg,加蒸馏水定容于250 ml容量瓶中,得到浓度为116.5 μg/ml的葡萄糖标准液。
2.1.2 猪苓总多糖样品液的制备取猪苓粗多糖制品加水溶解后定容于100 ml容量瓶中,摇匀,离心。精密取上清液6 ml,??6 mol/L HCl 5 ml,沸水浴加热60 min,冷后加1滴酚酞指示剂,用6 mol/L NaOH调至微红色,定量转移至25 ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀,离心,上清液备用。
2.1.3 最大吸收波长的确定分别取标准液和样品液各1 ml入试管中,各加6%苯酚试剂0.5 ml,摇匀,迅速滴加浓H2SO4 2.50 ml,混匀,放置5 min,冷至室温,同时做一试剂空白,在紫外分光光度计上于400~600 nm测定吸收度,结果标准品与样品均在496 nm处有最大吸收,故确定496 nm为测定波长。
2.1.4 标准曲线的制作分别加入浓度为116.5 μg/ml的葡萄糖标准液0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 ml于10 ml容量瓶中,各加水至刻度,再分别取1 ml对照品溶液各加6%苯酚0.5 ml,摇匀,迅速滴加浓H2SO4 2.50 ml,混匀,放置5 min,冷至室温,同时做一空白,在496 nm处测定吸收度,求得标准曲线的回归方程为:A=2.332×10-3+1.098×10-3C(r=0.999 2),结果表明在0~116 μg范围内吸收度与浓度呈线性关系。
2.2 提取工艺
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