针刺矫治骨折后肘内翻畸形实验研究.docVIP

针刺矫治骨折后肘内翻畸形实验研究 向　谊　黄伯灵　张　俊　聂　明　赵小寅　徐立群　潘仁智 　　(南京市中医院,江苏210001;南京军区总医院;厦门市中医院) 摘　要　通过在家兔肱骨下端内侧骨骺部形成不全骨折的手术方法,造成家兔肘部迟缓内翻模型。将44只模型家兔随机分成实验组与对照组。并将针刺组与不做任何治疗组相比,以及治疗不同时间段相比,观察针刺矫治动物内翻畸形的形态学及生物化学的改变,并采用计算机多参数测量技术进行大样本细胞图像定量分析,证实通过针刺刺激可促使生长滞缓侧骨骺部的软骨细胞、骨母细胞的增生繁殖,达到了矫治内翻畸形的目的。 　　主题词　畸形/针灸疗法　肘　骨折/并发症 　　 　　肘内翻畸形是儿童肘部骨折常见的并发症,发生率约在30%～70%之间,国内外至今尚未有非手术矫治该畸形的方法。近年来。我们在临床上采用针刺方法矫治该畸形获得满意疗效的基础上[1,2],又通过对骨折后发生肘内翻畸形的模型家兔分组进行了针刺治疗及对照观察,探讨了针刺矫治动物前肢肘内翻畸形的形态学及生物化学方面的变化。现将实验方法及结果报告如下。 　　1　材料和方法 　　1.1　实验动物模型的制备 　　采用南京军区总医院动物试验中心提供的出生40天的新西兰雄性家兔44只,平均体重1.05±0.32 kg,分批氯胺酮肌肉注射麻醉后,取动物左前肢肘内侧切口,分离皮下组织,在其肱骨下端内侧骨骺部(距内上髁5 mm处)用手术刀造成宽约1 mm,深约4 mm,横贯肱骨下端内侧的切口,使肱骨下端骨骺部形成不完全性骨折,压迫止血后,缝合皮肤,不采用外固定置饲养笼饲养40天。每10天将造模家兔固定于自制兔摄片架,两前肢采用1 kg重铁砣牵引使其肘关节处于伸直位,拍摄正位X线片,并在X线片上画线测量每只家兔内翻畸形后的肱骨角角度:即肱骨纵轴线与肱骨肘关节联线的外侧角,该角内翻时加大,外翻时缩小,且受前肢位置变化的影响较小[3]。40天测量后显示:造模家兔左前肢肘关节肱骨角已由造模前的平均90.31±1.89度,翻为97.07±2.06度,经统计学处理,造模家兔左前肢肱骨角不论与造模前相比,抑或与未造模之右前肢相比,差异均有高度显著性意义(P0.05)。实验组家兔,使用自制木质治疗架固定,每日对???左前肢肱骨下端内侧髁前、后缘,相当于人体穴位小海与少海二穴部位,各刺入一针,深达骨骺,连接G 6805电针仪,连续疏密微波电流以针柄微微颤动为宜,留针30分钟,每只兔总计针刺40次,对照组家兔则不进行任何治疗,两组家兔饲养条件完全相同。 　　1.3　观察方法 　　1.3.1　X线片测量 　　针刺前与每针刺10次即对实验与对照两组家兔摄片1次,在X线片上画线测量肱骨角角度,观察畸形纠正情况。 　　1.3.2　光镜、电镜观察 　　针刺治疗后每10天分别处死实验与对照组家兔各3只,分别取材制作光镜与电镜观察标本,其方法是将左肱骨下端骨骺部位标本分为3个区:不全骨折及周围为1区;1区远端部分别包括内侧关节面骨骺生长区、侧面骨骺生长区为2区;与2区对称的外侧关节面骨骺生长区,侧面骨骺生长区为3区(见图1);本实验主要将针刺实验组左肱骨下端2区与3区及对照组左肱骨下端2区进行对照观察。实验组左肱骨下端2区为针刺治疗区,3区及对照组左肱骨下端2区均为未经针刺治疗的对照组观察区。光镜标本采用HE染色,常规切片及部分采用含整个肱骨下端骨骺1,2,3区之大切片。除进行组织形态学观察外,还进行计算机细胞图象测定。电镜观察采用0.2 mol磷酸缓冲液配制的戊二醛固定液脱钙后固定制成电镜标本,日立透射电镜下观察。 　　1.3.3　生化测定 　　针刺治疗前第0天处死内翻模型兔4只,以后在针刺治疗后第20,40天分别处死实验与对照组家兔各4只;另取未造模出生80天的雄性家兔4只,处死后作为正常未造模家兔之对〖LL〗照。以上家兔处死后,将左前肢肱骨下端骨骺内外侧分为1和2两区,右前肢肱骨下端内侧骨骺为3区,将1,2,3区的前部分取下测氨基己糖,后部分测钙。针刺组1区是针刺刺激区,对照组1区无针刺刺激,取材部位分区如图2。氨基己糖的测定采用改变的Blmenkrantz法[4],钙的测定采用MTB法[5]。 　　1.3.4　肱骨下端肱骨角的标本测量 　　所有处死家兔在取标本前均先去除附着于两前肢肱骨上的肌肉与韧带,分置量角器上,测量其左右肱骨下端肱骨角的角度,按处死日期分组统计两组动物内翻角度纠正情况。 　　2　结果 　　2.1　X线片测量情况 　　针刺矫治10,20,30,40天后与对照组相比肱骨角改善情况见表1。 　　经统计学处理,实验组自针刺矫治第10天起与对照组相比,差异即有显著性意义(P[6]静止区细胞生长活跃,数目增多,层次增加,排列密集,其下方柱状