FluorChem Q凝胶成像分析系统在科研实验及教学中应用.docVIP

FluorChem Q凝胶成像分析系统在科研实验及教学中应用 　　摘 要：凝胶成像分析在生物及医药研究中已成为越来越重要的研究手段，对先进的FluorChem Q凝胶成像分析系统应用进行了初步阐述，该仪器运用到教学实践当中，使科研工作者对凝胶成像仪有进一步的了解，同时使得学生初步了解该仪器，提高学生的实践运用能力，达到理论与实践相结合的目的。 　　关键词：凝胶成像；核酸；蛋白；教学；应用 　　 　　Application of FluorChem Q gels image acquisition and analysis system 　　in scientific research and teaching 　　Pan Hongchao, Tang Danyang 　　Shantou university, Shantou, 515041, China 　　Abstract: Gel imaging analysis system in biological and medical research has become more and more important. This paper primarily elaborated the application of the advanced FluorChem Q gel imaging systems, which had been applied to practice in teaching. This introduction made scientific research workers further understanding thr FluorChem Q gel imaging systems, and made students preliminarily understand it’s application. The students’ practice skills were improved, and also achieve theory combined with practice in teaching. 　　Key words: gel imaging systems; nucleic acid; protein; teaching; apply 　　 　　凝胶成像分析系统及图像分析软件主要应用于生物、医学及医药研究领域，可用于拍摄核酸及蛋白电泳、菌落技术，还可用于荧光图像的采集，定量及半定量分析[1-3]，为科研人员提供了快捷方便的分析凝胶图像及相关生物学实验的工具。FluorChem Q是顶级的多色荧光、化学发光、可见光成像和定量分析系统，是目前同类产品中唯一兼顾多种应用的成像系统(如图1所示)。在一次分析中可同时检测5种蛋白,并对其进行定量分析。先进的CCD技术提高了成像的速度和定量分析的能力。将凝胶成像分析系统运用到本科及研究生实验教学中，可使学生了解相关领域较先进的研究方法和技术，有助于提高学生的实践能力及科学思维，培养复合型人才[4]。为此，以Alpha Innotech公司的FluorChem Q凝胶成像系统以及数据处理软件，初步阐述其在图像获取、存储、密度扫描及定量等方面的应用。 　　 　　1 实验图像的采集和存储 　　 　　打开电脑进入Windows界面后，开启暗箱电源及相机电源???双击桌面上的Alpha软件图标，在工具栏选择Acquire，进入图像捕获界面。仪器所配CCD镜头自动制冷至-20℃条件后才能较好地工作，所以需要提前半小时左右打开仪器预冷。然后在Cameral Set Preview(相机设计预览)窗口点击紫色Focus(聚焦)按钮。打开暗箱门，将样本依据其所需要的光源位置摆好。以核酸电泳及蛋白电泳采像为例，对于普通核酸凝胶采像，要移走可抽挡板(如图1所示)，把凝胶置于投射紫外灯箱上(图1标有DNA/RNA)。对于蛋白化学发光样品采像，插入可抽挡板(如图1所示)，把已孵有发光液的膜置于可抽挡板上(图1中标有Protein)。在不同操作时，要注意对焦。对焦步骤如下：打开镜头光圈，注意镜头光圈上数字越小光圈越大。在暗箱门打开的情况下，利用外界自然光线及显示器上实时显示的图像来调整样品位置，将其置于图像的最中心处，并聚焦至最佳状态，使图像看起来最清晰。调节ZOOM使样品尽可能占据整个图像。关闭暗箱门，选择一个合适的滤光片，1号位：无滤光片；2号位：EB滤光片；3～5号位：荧光通道。对于核酸电泳图像采集，我们选用2号位；对于蛋白电泳图像采集，我们选用1号位。凝胶采像结果如图2A和图2B所示，荧光图像采集根据要求用3～5号位采集图像，结果如图2C所示。 　　图1 FluorCh