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第二章 实验室检验 第一节 血液检验 一、血样的采集 (一)末梢采血? ? (二)静脉采血? (三)心脏采血? 一、血样的采集 根据检验项目及采血量的多少，以及动物的特点，可以选用末稍采血、静脉采血和心脏采血。 (一)末梢采血? 适用于采血量少，血液不加抗凝剂而且直接在现场检验的项目。如涂血片，血红蛋白测定、血细胞计数等。马、牛可在耳尖部，猪，羊，兔等在耳背边缘小静脉，鸡则在冠或肉髯。 ? (二)静脉采血? 适用于采血量较多，或在现场不便检查的项目。如血沉测定，红细胞压积容量测定及全面的血常规检查等。除制备血清外，静脉血均应置于盛有抗凝剂的容器中，混匀后以备检查。 马，牛、羊的采血一般多在颈静脉. 猪可在耳静脉或断尾采血，．如果小猪在耳静脉采血困难，必要时可在前腔静脉采血。使猪仰卧保定，把两前肢向后方拉直，同时将头向下压，使头颈伸展，充分暴露胸前窝. 禽可在内侧的翅静脉. 狗，猫及肉食兽可在四肢的静脉采血. 血样的采集 (三)心脏采血? 禽和实验小动物需要血量较多时可用本法。如鸡的心脏采血，? 右侧卧保定，左胸部向上，用l0ml注射器接上5cm长的20号针头，在胸骨脊前端与背部下凹处联线的中点，垂直或稍向前内方刺入2—3cm，可采得心血，成年鸡每次可抽5一l0ml。兔的心脏采血，在固定板上仰卧保定， 局部剪毛消毒，用左手后4个手指按紧兔的右侧胸壁，拇指感触兔左侧胸壁心脏搏动最强处，右手持注射器垂直刺入，边刺边回抽，如刺中右心室可得暗红色的静脉血，刺中左心室则抽出鲜红色的动脉血。成年兔每次可抽血10—20m1。 二、血样的抗凝及处理 (一)血样的抗凝? 1.双草酸盐合剂 2．乙二胺四乙酸二钠(简 称EDTA二钠) 3．柠檬酸钠。 4．肝素。 (二)血样的处理? 二、血样的抗凝及处理 (一)血样的抗凝? 除需分离血清外，自静脉或心脏采出的血液均应加入抗凝剂，以防血样凝固。临床常用的抗凝剂除肝素(具有抗凝血酶的作用)外，多数是以脱钙作用而使血液不能凝固。常用的抗凝剂有下列几种。 1.双草酸盐合剂。草酸铵1.2g，草酸钾0.8g，蒸馏水100ml。取此液0.5ml(分装于小瓶中，在60℃以下的烘箱中烘干)，可使5ml血液不凝固。由于草酸钾使红细胞皱缩，草酸铵则使红细胞膨胀，二者按比例混合，可使红细胞大小不致改变，适用于血液检验尤其是红细胞压积容量测定。但由于其具有一定毒性并可使血小板聚集，因此不宜作输血及血小板计数的抗凝剂。 2．乙二胺四乙酸二钠(简称EDTA二钠)。常用10％水溶液，按每5ml血液加入一至二滴使用，也可以将其水溶液二滴置小瓶中，在60℃以下烘干备用。此剂抗凝作用强，能保持血细胞的形态，可防止血小板聚集，最适于血液学尤其是血液有形成分的检验。但输血时不能用。 血样的抗凝及处理 3．柠檬酸钠。配成3.8％溶液，每0.5ml可使5m1血液不凝固，主要用于输血和血沉测定。不适用于血液化学检验。 4．肝素。配成1％水溶液放冰箱内保存，用0.1ml可抗凝5ml血液，用此液湿润注射器筒，采血5ml可不致凝固。此剂抗凝作用强，适用于血液有机和无机成分的分析，缺点是价格贵，抗凝时间短，其抗凝血作白细胞分类计数时，血细胞着色不佳。 (二)血样的处理? 血涂片应先预以固定。血样最好立即进行检验，否则，必须密封后放入冰箱内保存。用抗凝血作有关化验项目的最长保存时限。白细胞计数是2—3h，红细胞计数是24h，红细胞压积容量测定是24h血红蛋白测定是2—3天，血沉测定是2—3h，血小板计数约1h，网织红细胞计数是2—3h。 三、血液常规检验 （一）红细胞沉降速度测定 （二）血红蛋白含量测定 （三）红细胞计数 （四）白细胞计数 （五）白细胞分类计数 红细胞沉降速度测定 (一)原理? (二)测定方法 (三)注意事项? (四)正常参考值? (五)临床意义? 红细胞沉降速度测定 血液加入抗凝剂后，吸入特制的测定管中，在一定时间内红细胞下沉的毫米数，称为红细胞沉降速度，简称血沉。 (一)原理? 抗凝血中的红细胞沉降速度的快慢，是一个复杂的物理化学和胶体化学过程，其原理至今仍未完全阐明。一般认为，与血中电荷的含量有关。红细胞与血浆白蛋白带负电荷，而血浆球蛋白，纤维蛋白原和胆固醇却带正电荷，在正常时保持着正、负电荷相对的稳定性，红细胞不易形成串钱状，其沉降速度在正常范围内。在疾病过程中，上述任何一方的数目或含量改变，直接影响正负电荷相对稳定性。假如正电荷增多，则负电荷相对减少，红细胞互相吸附，形成串钱状而血沉加快，反之，红细胞互相排斥，则血沉变慢。 此外，认为与红细胞的下沉力和血浆的阻逆力之间是否保持一定的平衡状态有关。 红细胞沉降速度测定 (二)测定方法? 测定血沉的方法很多，有六五型血