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酶分离纯化

41.0 KDa M 1 2 图 3-3 纯化酶的SDSFigure 3-3 SDSof purified FUCenzyme M: Marker 1: EAS 2: EQFF 116.0 KDa 66.2 KDa 45.0 KDa 35.0 KDa 25.0 KDa 透析只需要使用专用的半透膜即可完成。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。截留分子量通常为1万左右。 (4)超过滤(Ultrafiltration) 超过滤即超滤,超滤是一种加压膜分离技术,即在一定的压力下,使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜,而使大分子溶质不能透过,留在膜的一边,从而使大分子物质得到了部分的纯化 自20年代问世后,直至60年代以来发展迅速,很快由实验室规模的分离手段发展成重要的工业单元操作技术。 超滤现已成为一种重要的生化实验技术,广泛用于含有各种小分子溶质的各种生物大分子(如蛋白质、酶、核酸等)的浓缩、分离和纯化。 超滤根据操作压力和膜的孔径不同,可分为微孔过滤、超滤和反渗透三种。 微孔过滤所用的操作压通常小于4×104Pa膜平均孔径为500埃~14×104埃,用于分离较大的微粒、细菌和污染物等。 超滤所用操作压为4×104Pa~7×105Pa,膜平均孔径为10—100埃,用于分离大分子溶质。 反渗透操

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