基因工程-第六章 外源目的基因表达与调控PPT.ppt

第六章 外源目的基因表达与调控;第一节外源基因表达机制（Mechanisms of Exogenous Gene）;一、外源基因的起始转录： 有效表达是基因工程的核心问题。 诱导型 启动子 组成型 二、mRNA的延伸与稳定： 外源基因有效表达的关键。 弱化子（衰减子，Attenuator），Poly （A）加尾信号：AAUAAA位点。;三、外源基因mRNA的有效翻译： 真核生物的基因在原核生物中有效翻译的基本原则： 3.1 AUG（ATG）作为首选的起始密码子； 3.2 含有SD（AGGAGG）序列； 3.3 SD序列与AUG起始密码子之间距离大约3-9个碱基； 3.4 翻译起始区的周围无明显二级结构。;四、表达蛋白在细胞中的稳定性： 4.1 构建融合蛋白表达系统； 4.2 构建分泌蛋白表达系统； 4.3 构建包涵体表达系统； 4.4 选择蛋白水解酶缺陷型受体系统 五、基因沉默： 主要发生在转基因动、植物上 位置效应：整合位点密切相关 转录水平的基因沉默：DNA水平的基因调控 转录后水平的基因沉默：RNA水平的基因调控;二、增强子（Enhancer）： 能够增强启动子转录活性的DNA顺式作用序列。 ①双向性； ②具有重复序列； ③增强子行使功能与所处的位置无关； ④特异性 ⑤增强子不仅与同源基因相连时有调控功能，与异源基因相连时也有功能。;三、终止子（Terminator）： 在基因转录后，RNA聚合酶遇到时能使转录终止的DNA序列。 四、衰减子（Attenuator）： 原核生物基因表达调控的精细调节装置，利用转录与翻译相偶联的特性，依赖自身巧妙的特征序列和相应的RNA二级结构，对基因转录进行开关式的微调作用。;五、绝缘子（Insulator）： 一种具有顺式调控作用的边界元件，能使其界定的染色体结构域上的基因免受区域外正调控和负调控信号的影响。 六、反义子（Antisensor）： 反义RNA（Antisense RNA）是一类与特定DNA序列互补的小分子RNA，编码反义RNA的DNA称为反义子。