外源基因表达调控2PPT.ppt

原生质体培养技术;三. 转录调控序列对外源基因表达的影响;;2. 诱导型启动子;诱导型启动子;;;损伤诱导型启动子;其它诱导型启动子;(3). 组织特异性启动子;(3)组织特异性(Tissue-specific)启动子 和器官特异性(organ specific )启动子;组织特异性(Tissue-specific)启动子和器官特异性(organ specific )启动子;组织特异性(Tissue-specific)启动子和器官特异性(organ specific )启动子;组织特异性(Tissue-specific)启动子和器官特异性(organ specific )启动子;组织特异性(Tissue-specific)启动子和器官特异性(organ specific )启动子;组织特异性(Tissue-specific)启动子和器官特异性(organ specific )启动子;;;三. mRNA3`-端非编码区序列对外源基因表达的影响; mRNA加尾过程;;;;三.mRNA3`-端非编码区序列对外源基因表达的影响;三. mRNA3`-端非编码区序列对外源基因表达的影响;;四.5`-端内含子对外源基因的表达调控作用;四.5`-端内含子对外源基因的表达调控作用;四.5`-端内含子对外源基因的表达调控作用;;四.5`-端内含子对外源基因的表达调控作用;五.外源基因在转(翻)译水平的调控;五.外源基因在转翻译水平的调控;五.外源基因在转翻译水平的调控;五.外源基因在转翻译水平的调控;五.外源基因在转翻译水平的调控;五.外源基因在转翻译水平的调控;6. 信号肽序列对转化外源基因翻译产物的调控作用;五.外源基因在转翻译水平的调控;;六.转基因植物中外源DNA整合的遗传效应 对基因表达的影响;六.转基因植物中外源DNA整合的遗传效应 对基因表达的影响;六.转基因植物中外源DNA整合的遗传效应 对基因表达的影响;六.转基因植物中外源DNA整合的遗传效应 对基因表达的影响;六.转基因植物中外源DNA整合的遗传效应 对基因表达的影响;;转录水平的基因沉默 　　转录水平的基因沉默是DNA水平上基因调控的结果，主要是由启动子甲基化或导入基因异染色质化所造成的。二者都和转基因重复序列有密切关系。　　重复序列可导致自身甲基化。外源基因如果以多拷贝的形式整合到同一位点上，形成首尾相连的正向重复（direct repeat）或头对头、尾对尾的反向重复（inverted repeat），则不能表达。而且拷贝数越多，基因沉默现象越严重。这种重复序列诱导的基因???默（repeat-induced gene silencing，RIGS）可能是重复序列间自发配对，甲基化酶特异性地识别这种配对结构而使其甲基化，从而抑制其表达。此外，重复序列间的相互配对还可以导致自身的异染色质化。其机理可能是异染色质化相关蛋白质识别重复序列间配对形成的拓扑结构，与之结合，并将重复序列牵引到异染色质区，或直接使重复序列局部异染色质化。 ;转录后水平的基因沉默 　　转录后水平的基因沉默是RNA水平基因调控的结果，比转录水平的基因沉默更普遍。特别是共抑制（cosuppression）共抑制是指在外源基因沉默的同时，与其同源的内源DNA的表达也受到抑制。转录后水平的基因沉默的特点是外源基因能够转录成mRNA，但正常的mRNA不能积累，也就是说mRNA一经合成就被降解或被相应的反义RNA或蛋白质封闭，从而失去功能。可能是由于同源或重复的基因表达了过量mRNA的结果。有人提出，细胞内可能存在一种RNA监视机制用以排除过量的RNA。当mRNA超过一定的域值后，就引发了这一机制。特异性的降解与外源基因同源的所有RNA。 此外，过量的RNA也可能和同源的DNA相互作用导致重新甲基化，使基因失活。　　共抑制 ，矮牵牛CHS;（四）转基因沉默 转基因沉默的机理 重复序列是基因沉默的普遍诱因，甲基化是基因沉默的直接原因 上述三种机制并不是独立的，而是相互关联的。基因沉默机制在核酸水平上均是DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA相互作用的结果，所以人们认为对基因沉默机制的研究开启了认识DNA水平及RNA水平上调节基因表达的新纪元，并提出了基因免疫，即基因组对外源基因入侵有抵抗能力的新观念。 ;六.转基因植物中外源DNA整合的遗传效应 对基因表达的影响;六.转基因植物中外源DNA整合的遗传效应 对基因表达的影响;六.转基因植物中外源DNA整合的遗传效应 对基因表达的影响;克服转基因沉默的策略 3、遗传转化方法上的改进： （3）利用双元细菌人工染色体（binary bacterial artificial chromosome，BIBAC）载体系统使大片段外源D