陈惠萍-经皮肾活检术.ppt.ppt

超薄切片 超薄切片 切片厚度由干涉色估计，其颜色与厚度的关系如下 干涉色　 　　切片厚度（nm） 灰色 50 银白色 　50~70　 金黄色 70~90 紫色 　 　90 选灰色和银白色的切片捞于有膜铜网（或镍网）（支持膜厚约10~20nm，无结构，耐电子轰击，不起化学反应 ） 染色 染色要求 理想染色剂 能增强反差 选择性地使重金属常沉淀在一定部位 保持微细结构的完整性 不与固定剂发生不良反应 室温和正常大气情况下，配制简单，操作方便，染色均匀 目前采用的是醋酸铀和柠檬酸铅双重染色，以达互补作用 染色 D 又称醋酸双氧铀，结构式UO2（CH3COO）2.2H2O，它可和大多数细胞成份结合，易与核糖核酸颗粒反应，降低组织类脂提取 PH值影响醋酸铀结合到生物各种基质上的能力，pH3.5时，双氧铀离子对DNA的亲和力增加 染色 柠檬酸铅 密度很大，对各种细胞都有亲和力，可提高反差 铅盐与核蛋白和糖原结合，几乎浸染所有细胞成份，提高切片反差 暴露空气易形成不溶性碳酸铅，染液混浊、切片污染（钠石灰置操作箱中，吸收CO2避免污染） 染色 柠檬酸铅液配制 高纯度或AR、GR的硝酸铅1.33g，柠檬酸钠［Na3（C6H5O7）.2H2O］1.76g，加双蒸水30ml 置50ml量瓶