GC外标法测定伤湿止痛膏中挥发性成分含量.docVIP

GC外标法测定伤湿止痛膏中挥发性成分含量 　　【摘要】 目的 建立了毛细管GC法测定伤湿止痛膏中樟脑、薄荷脑、冰片、水杨酸甲酯的含量测定。方法 采用DB—WAX毛细管柱，FID检测器，挥发油提取法净化样品，乙酸乙酯为稀释溶剂。结果 樟脑平均回收率96.8%；RSD为1.1%、薄荷脑平均回收率97.3%；RSD为1.4%、冰片平均回收率96.4%；RSD为0.9%；水杨酸甲酯平均回收率97.0%；RSD为1.1%。结论 改方法简单、准确、重复性好，为伤湿止痛膏的质量控制提高提供了依据。 　　【关键词】 伤湿止痛膏；樟脑；薄荷脑；冰片；水杨酸甲酯 　　伤湿止痛膏质量标准收载于《中国药典》2010年版一部，用于风湿性关节炎，肌肉痛，关节肿痛。其主要成分为樟脑、冰片、薄荷脑、水杨酸甲酯等，其质量标准中无对上述药味的含量控制方法。本试验采用GC法测定了伤湿止痛膏中挥发性成分樟脑、冰片、薄荷脑、水杨酸甲酯的含量，该方法操作简便、准确、重现性好，适用于该品种的质量控制。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 Agilent6890N气相色谱仪，FID氢火焰离子化检测器，载气为高纯氮气（99.999%），电子分析天平Mettler AE—240。 　　1.2 试药 对照品均由中检所提供樟脑对照品（批号110747—201008）、薄荷脑对照品（批号110728.200506）、冰片对照品（批号110743—200504）、水杨酸甲酯对照品（批号110707—201112）。试剂：乙酸乙酯为GC专用试剂； 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 色谱柱：DB—WAX柱（柱长30 m， 内径0.53 mm，膜厚1 μm），柱温120℃；分流进样。 　　2.2 对照品溶液制备与供试品溶液制备 　　2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取樟脑22.5 mg、薄荷脑17.5 mg、冰片对照品30 mg、水杨酸甲酯30 mg，置25 ml量瓶中，加乙酸乙酯使溶解，摇匀，作为对照品溶液。 　　2.2.2 供试品溶液制备 取本品4片，除去衬被，剪碎，置500 ml圆底烧瓶中，加水200 ml，照挥发油测定法（附录 X D）试验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶时为止，加乙酸乙酯2 ml，连接回流冷凝管，加热至沸腾并保持微沸3 h，放冷，乙酸乙酯液用铺有0.1 g无水硫酸钠的漏斗滤过，滤液转移至25 ml量瓶中，冷凝管及挥发油测定器内壁用乙酸乙酯少量洗涤，通过上述漏斗，并入量???中，加乙酸乙酯至刻度，摇匀，精密量取10 ml至25 ml量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，摇匀，即得。 　　2.3 提取时间考察 取同一批样品（批号：100904），分别保持微沸2 h、3 h、4 h，测定含量，结果2 h测定结果较低，3 h与4 h结果基本一致，因此提取时间定为3 h。 　　2.4 专属性考察 按照处方比例称取除樟脑、薄荷脑、冰片、水杨酸甲酯外的其余药味，按制备工艺制成缺樟脑、薄荷脑、冰片、水杨酸甲酯的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。将混合对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液，分别注入气相色谱仪进行测定。结果其他药味不干扰樟脑、薄荷脑、冰片、水杨酸甲酯的检出。 　　2.5 线性关系考察 精密称取上述三种对照品，加乙酸乙酯制成浓度为樟脑9.132 mg/ml、薄荷脑7.125 mg/ml、冰片12.117 mg/ml、水杨酸甲酯12.559 mg/ml的溶液作为混合对照品溶液I，精密量取混合对照品溶液I 0.1、0.5、1、5 ml分别置10 ml量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。精密吸取上述5种混合对照品溶液1 μl，注入气相色谱仪测定，由对照品浓度（X）与对照品峰面积（Y）进行回归，得回归方程：樟脑Y=1086.5x—8.6822，r=0.9999、薄荷脑y=2845.7x—4.5111， r=0.9999、冰片y=1795.3x—0.5533 r=0.9999、水杨酸甲酯y=657.95x—8.6611，r=0.9999结果表明樟脑在9.132～0.0913 mg/ml、薄荷脑在7.125～0.0712 mg/ml、冰片在12.117～0.1212 mg/ml、水杨酸甲酯12.559～0.1256浓度范围内线性关系良好，注：冰品峰面积以龙脑和异龙脑面积之和计算。 　　2.6 精密度试验 精密吸取同一批供试品溶液1 μl，连续进样6次，记录峰面积，结果精密度樟脑RSD为0.94%、薄荷脑RSD为1.27%、冰片RSD为1.18%、水杨酸甲酯RSD为0.91%。 　　2.7 稳定性试验 将同一份供试品溶液于室温下放置，分别于0、0.5、1、2、5、8、12 h各精密进样1 μl，按上述色谱条件检测，记录各