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诺如病毒衣壳蛋白表达的研究进展 生物技术 张生 诺如病毒 简介： 诺如病毒(Noro virus)是世界范围内引起儿童急性病毒性胃肠炎的主要病原,同时也是造成包括学校、家庭、旅游区、医院、食堂、军队的暴发性胃肠炎流行的重要病原, 对社会生产力产生巨大破坏力,其地位仅次于轮状病毒,国际上被列为B类恐怖因子. 诺如病毒是一组杯状病毒，基因组为单股正链线性RNA(ssRNA)，编码3个开放阅读框（ORFs）分别编码非结构蛋白、衣壳蛋白和一种功能未知的蛋白。 诺如病毒具有生存和变异能力很强的特点，拥有至少十种变异病毒，每一亚型内又有不同种类的毒株，感染一个类型病毒不能预防其他类型的感染。自然感染后缺乏交叉保护，这是很难开发诺如病毒疫苗的原因之一。 诺如病毒在感染病人粪便中排毒量少，排毒时间短，目前有无法在体外进行细胞培养，也没有适合的动物感染模型，在一定程度上限制了诺如病毒的研究。研究通过表达ORF2表达出重组病毒核衣壳蛋白代替天然病毒的核衣壳蛋白。 目前对衣壳蛋白采用多种表达系统和载体进行多层次、不同角度的研究。以下讲述五点内容： 2、诺如病毒衣壳蛋白的原核表达系统 原核表达系统相对于真核表达系统操作简单，尤其是当昆虫细胞培养难获得大量目标产物时更具优势。 研究发现，衣壳蛋白在原核表达系统中，产物不能自动组装成病毒样颗粒，说明病毒样颗粒的形成不是病毒与组织受体结合的必要条件。这样有利于研究各个片段的特性。通过不同重组片段免疫动物，表明衣壳蛋白的氨基端比羧基端富含抗原表位。 衣壳蛋白的原核表达 蛋白质的合成 原核表达系统也能表达出用于免疫研究的病毒衣壳蛋白，并且重组蛋白具有良好的抗原性，且对同一亚型的不同毒株表现为广谱反应。 3、诺如病毒衣壳蛋白腺病毒表达系统 腺病毒作为基因转移工具，具有其他病毒载体不及的优势：腺病毒颗粒比较稳定，基因组较少发生重排，插入外源基因在连续传代中保持不变；基因组操作较简单，易于制备大量病毒；可以感染分裂细胞和非分裂细胞，转导细胞种类多；外源基因表达水平较高。具有抗原制备快，操作安全，抗原不需纯化等优点。