南方红豆杉各部位中紫杉醇、10DABⅢ、7-木糖紫杉醇含量分析.docVIP

南方红豆杉各部位中紫杉醇、10DABⅢ、7-木糖紫杉醇含量分析 　　【摘要】　取1~3年生南方红豆杉中各部位(包括树根、树皮、叶片、枝条、主干木质部)进行分离，分析其在全株中所占的比例，进一步定量分析其各部位中紫杉醇、10DABⅢ、7-木糖紫杉醇的含量；发现南方红豆杉中各部位紫杉烷类化合物含量差异较大，对工业化生产过程中如何进行合理分类加工，从而达到最好的提取分离效果，起到很大的作用。 　　【关键词】　南方红豆杉；　紫杉烷类化合物；　含量 　　doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.20.103 　　由于南方红豆杉和其他品种红豆杉对比，各种紫杉烷类化合物的含量都比较低，在加工过程中提取有效成分有一定的难度，分离出的有效成分含量都比较低，因此，根据南方红豆杉各部位紫杉烷类化合物含量上的差异，选择不同部位进行分类加工，结果得到含量较高的不同种类紫杉烷类化合物，为半合成紫杉醇提供了大量的原料[1]。 　　1　材料与方法 　　1.1　原料与试剂　新鲜1~3年全株红豆杉、分析纯甲醇、分析纯氯仿、色谱纯乙腈、色谱纯甲醇。 　　1.2　仪器与设备　美国惠普公司Agilent1100高效液相色谱仪，上海申胜厂旋转蒸发仪和玻璃分液漏斗，上海实验仪器厂2K-82A型真空烘干箱。 　　1.3　实验过程 　　1.3.1　取刚入库的1~3年生新鲜全株南方红豆杉各5株；用剪刀分别把各株红豆杉的各部位(包括叶片、枝条、树皮、根系、主干木质部)分离开来[2]；各株红豆杉各部位分别称重，统计数据。 　　1.3.2　对各部位(包括叶片、枝条、树皮、根系、主干木质部)分别破碎、混匀后，检测其水分，取各部位一定量原料(各做2~3个平行样)，投入旋转蒸发仪内，然后加入99%甲醇，使甲醇液面高于原料，开启旋转蒸发仪，转速为35次/min，提取温度控制在55 ℃左右，4 h/次，共提取3次；每次提取完后用布氏漏斗将提取液过滤出来，提取液用旋转蒸发仪浓缩，浓缩至其比重0.960~0.970为止，浓缩温度控制在55 ℃左右，真空控制在0.08~0.1 MPa[3]；浸提浓缩液加入玻璃分液漏斗内，然后加入等体积纯氯仿进行萃取，静置30 min以上，放出氯仿层，水相再加入等体积纯氯仿进行萃取，共萃取3次，合并氯仿萃取液，放入旋转蒸??仪内浓缩，浓缩温度控制在55 ℃左右；回收氯仿，温度控制在45 ℃左右，真空控制在0.08~0.1 MPa[4]；萃取液浓缩至发泡后，用勺子刮出，放置真空烘干箱内，温度控制在55 ℃左右，真空控制在0.08~0.1 MPa，干燥后称重[5]；送样检测。 　　1.3.3　检测出各部位(包括叶片、枝条、树皮、根系、主干木质部)中紫杉醇、10DABⅢ、7-木糖紫杉醇的含量，乘以各部位所得到的浸膏量，得到各部位所得浸膏量中紫杉醇、10DABⅢ、7-木糖紫杉醇的有效量，然后除以投入原料的重量，得到各部位中紫杉醇、10DABⅢ、7-木糖紫杉醇的总万分含量。 　　2　结果 　　2.1　检测图谱及实验数据分析见图1。 　　2.2　新鲜全株红豆杉各部位所占比率见表1，图例见图2。 　　表1　新鲜全株红豆杉各部位所占比率 　　图2　新鲜全株红豆杉各部位所占比率 　　由此可见，全株新鲜红豆杉苗木中，叶片占主要成分，依次为：叶片根系枝条主干木质部树皮。 　　2.3　1~3年生全株红豆杉各部位中投入与产出紫杉醇、10D、7-木糖分析比较见表2。 　　2.4　1~3年生全株红豆杉各器官中紫杉醇、10D、7-木糖含量分析比较见表3。 　　2.5　文献中不同品种红豆杉不同部位紫杉醇的百分含量比较见表4。 　　根系中，以紫杉醇含量最高，平均达万分之5以上，而10D、7-木糖含量偏低，低于叶片中的含量；叶片中，以10D含量最高，平均达万分之3.8，7-木糖含量也很高，略低于树皮中的含量；树皮中，以7-木糖含量最高，平均达万分之9.8，紫杉醇、10D含量也比较高，都在万分之1以上，其中紫杉醇达万分之1.6；枝条中，以紫杉醇含量最低，仅万分之0.2756，10D、7-木糖含量也仅在万分之1左右；主干木质部中，紫杉醇、10D、7-木糖含量都是最低，而三者当中又以紫杉醇含量居尾。 　　表4　文献中不同品种红豆杉不同部位紫杉醇的百分含量 　　3　讨论 　　从以上分析结果得出，南方红豆杉各部位中三种紫杉烷类的含量区别：(1)紫杉醇含量：树根树皮叶片枝条木质部；(2)10D含量：叶片树根树皮枝条木质部；(3)7-木糖含量：树皮叶片树根枝条木质部。 　　通过对南方红豆杉各部位中紫杉烷类的分布情况分析，有助于在需要某种紫杉烷类化合物时，只选择南方红豆杉中某个部位进行加工，就可得到较多的有效成分。同时也可以得出，南方红豆杉含有各种紫杉烷类化合物，虽然含量不高，但是通过对其各