膜联蛋白Ⅰ在非小细胞肺癌中表达及临床意义.docVIP

膜联蛋白Ⅰ在非小细胞肺癌中表达及临床意义 　　[摘要] 目的 探讨膜联蛋白Ⅰ（Annexin Ⅰ）在非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer，NSCLC）中的表达及临床意义。方法 应用免疫组化法检测79例非小细胞肺癌中Annexin Ⅰ蛋白表达水平。 结果 在79例非小细胞肺癌组织中，有40例为Annexin Ⅰ高表达（50.6%），鳞癌为包膜表达，腺癌为包膜表达或包膜与胞浆均有表达，但以包膜表达为主。Annexin Ⅰ表达水平与非小细胞肺癌患者的淋巴结受侵相关（P = 0.022，P ＜ 0.05），而与性别、年龄、病理类型、分期均无明显相关性（P ＞ 0.05）。Annexin Ⅰ阳性表达患者和阴性表达患者的疾病进展时间（time to progression，TTP）差异有统计学意义（P 　　[关键词] 膜联蛋白Ⅰ；非小细胞肺癌；转移；免疫组化 　　[中图分类号] R734 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2012）05（b）-0077-03 　　膜联蛋白Ⅰ（Annexin Ⅰ）属于膜联蛋白家族中的成员之一，又被称为Annexin A（Annexin-1，Anx-1），属于钙离子依赖的磷脂蛋白超家族，是第一个被鉴定的Annexins家族成员。Annexin Ⅰ是表皮生长因子受体（epithelial growth factor receptor，EGFR）络氨酸激酶磷酸化的底物，能在上游特异性的调节细胞外信号控制的激酶级联反应，同时还参与细胞信号的传导、细胞迁移、细胞分化、增殖、细胞与细胞之间及细胞与间质之间的相互作用，与肿瘤的转移相关[1]。大量证据表明，不同组织来源的正常的及其肿瘤组织中的乳腺癌、前列腺癌、大肠癌、肝癌等均有Annexin Ⅰ表达，Annexin Ⅰ在多种肿瘤中的表达呈现组织特异性分布[2]，可能与这些肿瘤的发生、发展及转移有一定相关性。但AnnexinⅠ蛋白在非小细胞肺癌中的相关性研究不多，本研究应用免疫组化分析Annexin Ⅰ在肺鳞癌、腺癌中的表达，评价Annexin Ⅰ表达与临床病理因素的关系，探讨AnnexinⅠ在肺癌发生、发展及转移中的作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 标本收集 　　收集2004年1月~2006年12月哈尔滨医科大学附属第三医院病理科存档的79例非小细胞肺癌（NSCLC）的手术组织标本。本研究79例患者中，男41例，女38例；年龄 ＜ 40岁23例， ≥ 40岁56例；鳞癌39例，腺癌40例；淋巴结受侵组46例，无淋巴结受侵组33例；（Ⅰ+Ⅱ）期28例，（Ⅲ+Ⅳ）期51 例。所有患者术前均未接受放、化疗及靶向治疗。本研究得到哈尔滨医科大学附属第三医院伦理委员会批准。 　　1.2 主要试剂和实验方法 　　兔抗人Annexin Ⅰ多克隆抗体和免疫组化检测试剂盒，分别购自美国Zymed实验室和北京中杉公司。采用免疫组织化学法将79例非小细胞肺癌标本均进行Annexin Ⅰ（1∶150）免疫组织化学染色。染色方法严格按说明书进行。用磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，PBS）代替一抗作为阴性对照，AnnexinⅠ阳性切片作为阳性的对照。 　　1.3 结果判定 　　Annexin Ⅰ的阳性染色均以肿瘤细胞膜出现棕黄色颗粒时为阳性表达，以染色强度和阳性的细胞数比例来评定阳性表达。结果判定在双盲方法下进行，每张切片在光镜下随机的被选取5个视野，每个视野计数瘤细胞100个，染色强度分为：无色（－）为0分，浅黄色（+）为1分，黄色或更深颜色（++）为2分。阳性细胞数分级：≤50%为0分，51~75%为1分， ＞ 75%为2分。上面两项得分乘积结果≥2分则为阳性病例。 　　1.4 统计学方法 　　采用SPSS 17.0统计软件进行数据处理，计数资料采用χ2检验，生存分析采用Kaplan-Meier法。以P ＜ 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　在79例非小细胞肺癌组织中，有40例为Annexin Ⅰ高表达（50.6%），其中鳞癌为包膜表达，腺癌为包膜或胞浆均有表达，以包膜表达为主。见图2、3。非小细胞肺癌组织中Annexin Ⅰ的表达情况与肺癌患者淋巴结受侵相关（P = 0.022，P ＜ 0.05），而与患者的性别、年龄、病理类型及分期之间的关系不明显（P ＞ 0.05）。见表1。淋巴结受侵组的Annexin Ⅰ的阳性表达组的平均疾病进展时间为5.1个月，Annexin Ⅰ阴性表达组的平均疾病进展时间为6.3个月，组间比较差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。见图1。其中47例病例可评价明确的疾病进展时间，在这些病例中，Annexin Ⅰ的阳性表达患者与阴性表达患者的疾病进展时间的关系有统