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生 物 技 术 通 讯
650 LETTERSINBIOTECHNOLOGY Vol.18No.4Jul.,2007
文章编号：1009-0002(2007)04-0650-03 技术方法
RNA原位杂交技术的一些应用技巧
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林大河 ,叶文铎 ,唐清煌
1.福建师范大学 生命科学学院,发育与神经生物学福建省高校重点实验室,福建 福州 350108;
2.厦门大学 生命科学学院,福建,厦门 301005
[摘要] 目的:检测基因在动物组织或细胞中的时空表达模式。方法:转录反义RNA探针;利用RNA原位杂交技术检测人
和小鼠牙原基中若干基因的表达。结果与结论:通过优化条件,转录出完整的反义RNA探针,并成功地利用RNA原位杂交
技术在组织中检测到基因的表达;分析了一些在RNA原位杂交的过程中可能碰到的问题及其解决方法。
[关键词] RNA原位杂交;基因表达
[中图分类号] Q78 [文献标识码] A
TheApplicationofInSituHybridizationTechniquewithRNAProbes
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LINDa-he,YEWen-duo,TANGQing-huang
1.TheHigherEducationalKeyLaboratoryofFujianProvinceforDevelopmentalBiologyandNeurobiology,CollegeofLife
‘
Sciences,FujianNormalUniversity,Fuzhou3501082.CollegeofLifeSciences,XiamenUniversitu,Xiamen361005,China
[ ]
Abstract Objective:Todetectthetemporalandspatialexpressionpatternsofgeneinanimaltissue.Methods:Anti-
sensemRNAprobesweretranscriptedandRNAinsituhybridizationwasperformedtoexaminetheexpressionpatternof
genesinthedevelopingmouseandhumantoothgerm.Results Conclusions:Theanti-senseprobesweretranscripted
completelyandthegeneexpressionweredetectedsuccessfully. Someproblemsconcernedintheprocesswereanalyzed,
andthemethodshowtoresolveitbaseonourpastexperiencesweregiven.
[ ]
Keywords RNAinsituhybridizationgeneexpression
‘
研究基因的表达模式是探索其功能的重要环节之一。利用 1 材料与方法
Northern杂交可以说明特定基因在不同器官、不同时期的表达情
况,但是若要在显微或亚显微水平对基因的时空表达模式进行 1.1 材料
研究,单靠Northern杂交就显然不够了,而根据核酸分子杂交的 人、昆明小鼠的组织标本均取自各自相应时期的胚胎。
基本原理和免疫组织化学的方法而发展起来的RNA原位杂交 购自 公司;转录探针
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