05体内药物分析PPT.ppt

分离与浓集 固相萃取SPE 是目前使用相当广泛的一种萃取方法，惜乎价格较贵 将不同填料作为固定相装入小柱，药物溶液通过小柱时，药物被吸附、分配、离子交换，或其它亲和力作用，使药物及内源性物质同时被保留在固定相上，再选用适当溶剂洗脱药物的方法 这方面，美国是老大 用有机溶剂(甲醇)冲洗——洗净 用水冲洗——活化 上样 用水或缓冲液冲洗，洗去内源性物质 有机溶剂洗脱药物 收集洗脱液······ 固相萃取步骤 方法好价格贵 ①固相选择 样品1ml 1ml规格固相 1~25ml 3ml规格固相 ②固相处理 反相C18 固定相的6~10倍体积甲醇洗柱，使溶剂化 6~10倍水缓冲服液冲洗达分离状态 ③上样 ④分离 用适当的弱溶剂洗涤 洗去杂质，通N2干燥固相 ⑤洗脱待测物 改变pH或极性 固相萃取具体步骤 （1）流速 流速快，按触不充分，样品流失 回收率低 柱处理 5~10ml·min-1 洗脱 0.2~1ml·min-1（〈300mg〉 2~5ml·min-1（300mg） （2）装样 过载 突破性试验 已知浓度样品液 ① 小体积上柱→洗脱回收百分率 ②加大体积→洗脱回收百分率 ③绘图 当回收率下降时为过载 固相萃取具体