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2018-06-10 发布于江苏
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Caco-2细胞的培养PPT.ppt

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Caco-2细胞的培养PPT

Caco-2细胞的培养技术费方利 2007-12-30 一、细胞实验的准备工作培养基的配置 DMEM培养基，用滤器过滤后灭菌。 PBS的配置配10×的贮存液，用时稀释，120℃灭菌。细胞冻存液的配置血清：DMSO=9：1 二、无菌操作 70%酒精擦拭超净台，实验用品擦拭后放入超净台，紫外灭菌30min 擦拭双手，点酒精灯小心取用无菌实验用品，切勿碰触吸管与吸头头部或容器瓶口,不要在打开的容器正上方操作实验。二、无菌操作容器打开后，用手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，瓶盖侧放实验操作应在操作台中央无菌区域内进行实验完成后取出实验用品，擦拭超净台三、细胞冻存及复苏细胞的冻存：液氮罐中，-170℃，缓慢冷却细胞的复苏快融方法，42℃ 五、细胞传代细胞生长至高密度时，即须分至新的培养瓶中胰酶消化细胞加入培养基，停止消化吹散细胞，1000rpm离心5min 倒去上清，加培养基，吹散细胞加细胞悬液至细胞培养瓶中，倒培养基