二维电泳PPT.ppt

二维电泳技术;蛋白质组学;蛋白质组分析的首要要求;发展简史;二维电泳的原理;蛋白样品制备;细胞裂解;样品的溶解;增加样品溶解性的手段;起载体作用的两性电解质（ Carrier ampholytes ）：即便在变性剂和表面活性剂存在的情况下，某些蛋白质也需要在盐离子的作用下才能保持其处于溶解状态，否则这些蛋白质在其处于PI点时会发生沉淀。两性电解质的作用在于捕获样品中的少量盐分，从而保证蛋白质的溶解性。应用时，两性电解质的浓度应小于0.2％（w/v)。浓度过高会使IEF的速度降低。另外，为了保证实验的精确性，在选择不同pH范围的IPG胶条时，也应使两性电解质的pH值与之相符合。;非蛋白物质的去除;避免蛋白水解和降解的措施;样品制备实例;一维固相pH梯度等电聚焦（IEF with IPG）： ;Rehydratation of IPGs dry strips Applying the sample: in gel hydratation load coupling Running IPG strips ;IPG胶条的蛋白质大约载样量;pH梯度的选择 ;聚焦时间的优化 ;一维程序设置实例;两维间的平衡 ;二维SDS;凝胶染色;凝胶的图像处理分析;N8;THE END