动物生物化学第十五章蛋白质翻译PPT.pptVIP

第15章 蛋白质翻译 Protein Biosynthesis (Translation);本章主要内容：;基因在原核和真核细胞中最终得到表达;原料氨基酸，20种 mRNA是合成蛋白质的“蓝图（或模板）” tRNA是原料氨基酸的“搬运工” rRNA与多种蛋白质结合成核糖体作为合成多肽链的装配机（操作台）;蛋白质翻译系统示意图; 遗传密码;遗 传 密 码 表; 原核tRNA有30-40种，真核有50-60种，含70-90个核苷酸， 并有多种稀有碱基。 tRNA是最小的RNA， 占细胞总RNA 的15%左右，其功能是搬运氨基酸和解读密码子。 tRNA 具有“四环一臂”和“三叶草” 形的典型结构。;tRNA的结构—“四环一臂” 倒L形的三级结构 ; tRNA的功能是解读mRNA上的密码子和搬运氨基酸 tRNA上至少有4 个位点与多肽链合成有关：即3’CCA氨基酸接受位点、氨基酰-tRNA合成酶识别位点、核糖体识别位点和反密码子位点。 每一个氨基酸有其自身的tRNA。氨基酸的羧基与tRNA的 3’ CCA-OH以酯键结合。 氨基酸与mRNA相应的密码子正确“对号”须依赖于tRNA的反密码子。 密码子与反密码子的配对方式;变偶性——反密码子5’端的碱基与密码子的第三位配对不严格; 核糖体是rRNA 与几十种蛋白质的复合体，有大、小两个亚基构成。含有合成蛋白质多肽链所必需的酶、起始因子（IF）、延伸因子（EF）、释放因子（RF）等。 原核的核糖体（70S）= 30S小亚基 + 50S大亚基 其中 30S小亚基含16S rRNA 和21种蛋白质 50S大亚基含23S，5SrRNA和34种蛋白质 真核的核糖体（80S）= 40S小亚基 + 60S大亚基 其中 40S 小亚基含18S rRNA 和33种蛋白质 60S 大亚基含28S，5.8S，5SrRNA和45种蛋白质; rRNA 只有4-5种占细胞RNA 的大部分 。 图为原核生物的两种 16S rRNA和5S rRNA 的结构;小亚基;核糖体;原核70S核糖体和真核80S核糖体的结构和组成; 核糖体有4个基本功能 1. 容纳mRNA，并能沿着mRNA由5’——3’ 移动，由tRNA解读其密码； 2. 氨基酰位点（A位点），可结合氨基酰-tRNA（AA-tRNA）； 3. 肽酰基位点（P位点），可结合肽酰基-tRNA（肽-tRNA）； 4. 肽酰基转移酶中心，是形成肽键的位点等。 ; 所有参与合成多肽链的氨基酸都要激活，并由数十种高度专一的氨基酰-tRNA合成酶催化。该酶由两个识别位点，它们能识别特定的氨基酸和选择其所对应的tRNA，使两者连接起来（利用ATP）。 反应如下： 氨基酸的羧基与tRNA 的3’端CCA-OH 以酯键相连，因此其氨基是自由的。;氨基酸与tRNA的 连接方式;首先IF3、IF1帮助30S小亚基 与mRNA结合，IF2和GTP帮助 甲酰甲硫氨酸-tRNA与AUG配 对，接着IF3脱离，形成30S 起始复合物。50S大亚基进入， IF1和IF2脱离，形成50S起始 复合物，需要GTP。甲酰甲硫 氨酸-tRNA处于P位。;起始密码AUG上游的S.D序列与16S rRNA3’端互补结合有利于30S起始复合物的形成;2.3、肽键的形成和延伸;新的氨基酸-tRNA的进位依赖EF-Tu和Ts因子的协助;肽键的形成 ;肽键的形成由肽酰基转移酶催化 （此酶具有核酶的活性）;原核生物肽链的延长 ; 氨基酸进位，肽链形成和延伸，核糖体沿着mRNA的5’——3’ 方向移位，循环往复，新合成的肽链由氨基端向着羧基端不断延长，直至mRNA上出现终止密码，相应的肽链释放因子RF1（对应UAA、UAG），RF2（对应UAA、UGA）占据A位。肽链的合成终止，并从核糖体上释放。 核糖体大、小亚基解聚，并进入下一轮合成。;蛋白质合成的终止 ;多个核糖体结合在同一条mRNA上，由5’—