高中生物苏教版选修3教学案：第一章 第三节 蛋白质工程(含答案).docVIP

第三节蛋白质工程 1.蛋白质工程是指通过物理化学与生物化学等技术了解蛋白质的结构与功能，并借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组DNA技术改造基因，以定向改造蛋白质，甚至创造出自然界不存在的蛋白质的技术。 2．蛋白质工程的关键技术是基因工程。 3．蛋白质工程的一般过程是：预期蛋白质功能→分子设计蛋白质→合成相应基因→基因指导新蛋白质合成。 4．实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系。 5．根据蛋白质被改动部位的多少，可将蛋白质改造类型分为“大改”、“中改”和“小改”。 6．通过蛋白质工程，可获得热稳定性高的酶和新型药物。 蛋白质工程概述 1．蛋白质工程的概念 (1)手段： ①通过物理化学和生物化学等技术了解蛋白质的结构和功能。 ②借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组DNA技术改造基因。 (2)目的：定向改造天然蛋白质，甚至创造自然界不存在的蛋白质。 (3)关键技术：基因工程。蛋白质工程又称第二代基因工程。 2．蛋白质工程的一般过程 先根据新蛋白质预期功能设计相关蛋白质结构，进而设计对应的氨基酸序列，在此基础上合成可产生新蛋白质的相关脱氧核苷酸序列(基因)，再利用基因工程技术合成新的蛋白质。 3．改造蛋白质的方式 改造方式 相关操作 大改 根据氨基酸的性质和特点，设计并制造出自然界中不存在的全新蛋白质，使之具有特定的氨基酸序列、空间结构和预期功能 中改 改变蛋白质分子中某一个多肽片段或一个特定的结构 小改 通过基因工程中的定点诱变技术，有目的地改造蛋白质分子中某活性部位的一个或几个氨基酸残基，以改善蛋白质的性质和功能 1．对天然蛋白质进行改造，是通过直接对蛋白质分子进行操作来实现的吗？ 提示：不是，由于基因决定蛋白质，因此要对蛋白质的结构进行设计改造，最终必须通过改造基因来完成。 2．蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同？ 提示：基因工程是按照中心法则进行的：基因→表达(转录和翻译)→形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能，基本上是生产出自然界已有的蛋白质。蛋白质工程却与之相反，一般是先创造出适合人类需求的新基因，然后使其表达出具有特定结构和功能的蛋白质。蛋白质工程可以创造出自然界不存在的蛋白质。 3．假如某科学家设计出某种蛋白质的空间结构，你能否设计出利用大肠杆菌生产该蛋白质的流程？ 提示：蛋白质的空间结构→氨基酸序列→合成目的基因→构建基因表达载体→导入大肠杆菌→产生相应蛋白质。 4．PCR技术在基因定点诱变中的技术流程是什么？ 提示：先人工合成带有突变位点的引物，通过PCR扩增而获得定点突变的基因，再通过基因工程方法，将突变基因导入受体细胞，经过转录和翻译就可合成所需的蛋白质。 1．蛋白质工程的操作步骤 (1)从生物体中分离纯化目的蛋白。 (2)测定其氨基酸序列。 (3)借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段，尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构。 (4)设计各种处理条件，了解蛋白质的结构变化，包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响。 (5)设计编码该蛋白质的基因改造方案，如定点突变。 (6)分离、纯化新蛋白，功能检测后投入实际使用。 [特别提醒]　蛋白质工程并不是直接改造蛋白质，而是通过对基因操作来实现对天然蛋白质的改造，主要原因如下： ①任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造的蛋白质还是无法遗传的。 ②对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度要小得多。 2．定点诱变技术和非定点诱变技术 (1)定点诱变技术：基因的定点诱变技术是改变蛋白质结构的核心技术之一。 项目 内容 条件 原料 脱氧核苷酸 酶 DNA多聚酶(聚合酶)和DNA连接酶 引物 含突变位点的DNA分子片段 操作方法 PCR技术 结果 后代中半数为诱变的DNA分子 适用范围 空间结构完全清楚的蛋白质，进行“小改” 特点 定点诱变有目的性和针对性 (2)非定点诱变技术： ①适用对象：对于不能预先确定诱变位点的蛋白质，可采用非定点诱变技术来进行蛋白质的改造。 ②特点：非定点诱变突变位点多，有时甚至会产生出意想不到的改造效果。 3．基因工程与蛋白质工程的比较 项目 基因工程 蛋白质工程 区 别 起点 目的基因 预期蛋白质功能 过程 获取目的基因→构建基因表达载体→导入目的基因→检测和鉴定目的基因→实现功能表达 蛋白质结构分析→结构预测与设计→基因工程→蛋白质纯化→功能分析 实质 定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品 定向改造和生产人类所需的蛋白质 结果 生产自然界已存在的蛋白质 定向改造天然蛋白质，甚至创造出自然界不存在的蛋白质 联系 蛋白质工