红曲霉的代谢产物MonacolinK研毕业设计论文.docVIP

摘要 红曲的药用价值和保健功效日益引人关注，其中洛伐他汀作为红曲主要的调脂因子成为科研热点和红曲产业发展的重点。聚酮化合物Monacolin K是其中一种高效的降胆固醇药物，由红曲菌和土曲霉次级代谢产生，本实验研究红曲霉的代谢产物Monacolin K，通过对红曲霉次级代谢产物的测定，我们确定它产生Monacolin K最多的生长期，然后我们对其菌液进行RNA提取，通过对RNA的逆转录，我们得到cDNA，进行PCR扩增，验证Mokf和Mokh两段目的基因的存在，以及它们对红曲霉代谢产生Monacolin K的重要作用。对红曲菌功能基因组的深入研究，以及相应遗传转化体系的建立与完善，我们还需更加努力。 关键字：红曲 Monacolin K PCR RNA提取 红曲霉 Abstract The medicinal value and health care function of red rice is becoming more and more attractive to people, Lovastatin as red rice main lipid factor become research hot spot and focus of red rice industry development. Monacolin K, one of potent cholesterol-lowering polyketide compounds, could be produced by Monascus spp and Aspergillus terreus. we experiment on Monacolin K which is one of monascus metabolites. According to the determination of monascus secondary metabolites，We determined the growing period when it produce Monacolin K fastest. Then we extract RNA on its microbial. Based on the reverse transcription of RNA, we obtain cDNA, then we amplify cDNA using PCR. We validate the existence of two aim genes Mokf and Mokh and their importance to monascus producing Monacolin K . With the further study on Monascus functional genomics, as well as the establishment and improvement of the corresponding genetic transformation system, we have to work harder. Key words：Monacolin K red rice PCR extract RNA monascus 第一章 绪论 7 1.1 红曲和红曲霉 7 1.1.1 红曲和红曲霉的概述 7 1.1.2红曲和红曲霉的发展前景 7 1.2 红曲霉的生物学特征 10 1.2.1红曲霉的分类 10 1.2.2红曲霉的形态学特征 10 1.3 红曲霉的代谢产物 11 1.3.1 莫纳克林K 11 1.3.2 红曲红素 13 1.3.3 桔霉素 14 1.4红曲霉的培养 14 1.4.1固态发酵 14 1.4.2液态发酵 15 1.5洛伐他汀（Monacolin k） 15 1.5.1 他汀化合物的简述 15 1.5.2 他汀类化合物的结构 16 1.5.3 红曲洛伐他汀 16 1.6 研究内容和意义 17 第二章 实验材料与方法 18 2.1 实验材料 18 2.1.1 实验所用菌种 18 2.1.2 实验所用培养基 18 2.1.3主要仪器和试剂药品 18 2.2 实验方法 20 2.2.1 菌种培养 20 2.2.2 菌落观察及菌落生长情况及代谢产物测定 21 2.2.3 DNA的提取及检测 21 2.2.4 RNA的提取 22 2.2.5逆转录RNA成cDNA（建立20ul反应体系） 24 2.2.6 PCR扩增逆转录得到的cDNA 25 第三章 实验结果与分析 26 3.1 实验结果 26 3.1.1 菌落形态观察 26 3.1.2 菌种生长曲线 27 3.1.3 莫纳克林K代谢情况 27 3.1.4 红曲霉DNA Pcr扩增琼脂糖