第五章 转录.pptPPT.ppt

不同生物的复制体系;1）半保留复制方式 2）半不连续复制 3） DNA 螺旋酶, SSBP 4） RNA 引物; 复制子的大小 : 酵母 平均 40 kb 脯乳动物 平均 100 kb 原核生物 1000 kb 冈崎片段 原核生物 1000-2000 nt 真核生物 100-200 nt 复制速度 原核生物 50,000bp/min (750/sec) 真核生物 3,000bp/min (50/sec); RNA合成的基本特征： 5’→3’ 方向； 底物三磷酸核苷酸（NTP） 不对称转录，以单链DNA为模板。 不需要引物，合成是连续的。 对一个基因组来说，转录只发生在一部分基因，且每个基因的转录都受到相对独立的控制。;大肠杆菌RNA聚合酶的组成;典型原核生物启动子的结构;;真核生物 RNA pol 启动子;? 原核生物转录初始的tRNA和rRNA都不是最初的转录产物;真核mRNA的加工和成熟 ;第五章 转录 ;转录（transcription）：以DNA为模板合成RNA的过程。 转录所需的酶叫做依赖DNA的RNA聚合酶。 转录产生初级转录物为RNA前体（RNA precursor），必须经过加工过程变为成熟的RNA。;;模板链, 无意义链：在DNA的两条多苷酸链中只有其中一条链作为模板。 编码链，有意义链: DNA双链中另一条不做为模板的链； 不对称转录：RNA的转录合成是以DNA的一条链为模板而进行的。;第一节 转录酶 第二节 启动子 第三节 终止子 第四节 转录的机制 第五节 转录产物的后加工 第六节 RNA的剪接;第一节 转录酶 1 原核生物的RNA聚合酶 2 真核生物的RNA聚合酶; RNA合成的基本特征： 5’→3’ 方向； 底物三磷酸核苷酸（NTP） 不对称转录，以单链DNA为模板。 不需要引物，合成是连续的。 对一个基因组来说，转录只发生在一部分基因，且每个基因的转录都受到相对独立的控制。;;1.2 组成;1.3 各亚基的功能 β亚基：由rpoB编码，结合底物（NTP及新生RNA链），进行聚合作用。 β′亚基：由rpoC编码，可能与模板结合。 α亚基：由rpoA编码，可能参与全酶的组装及全酶识别启动子，还参与RNA聚合酶与一些调控因子间的作用。 ω 亚基：约10KD,作为核心酶，具体功能不清楚。 σ亚基/?因子：使全酶识别启动子并与之结合，也看作一种辅助因子。;1.4 σ亚基/因子;?因子更替的现象 在细菌受到外界环境的急剧影响时，会改变所表达的基因，产生?因子更替的现象。 如环境温度升高时，大肠杆菌会开启rpoH基因的表达， 其产物?32能识别热激基因的启动子，而正常状态下表达的基因会关闭或表达水平下降。 芽孢菌生活周期过程中生活方式的改变也是通过?因子的更替完成的。;第一节 转录酶 1 原核生物的RNA聚合酶 2 真核生物的RNA聚合酶;;某些常用的转录抑制剂;2.1 真核RNA聚合酶的结构特点：;;2.2 线粒体和叶绿体的RNA pol;第一节 转录酶 第二节 启动子 第三节 终止子 第四节 转录的机制 第五节 转录产物的后加工 第六节 RNA的剪接; 1 原核生物的启动子  2 真核生物的启动子;1 原核生物的启动子;;典型原核生物启动子的结构;1） 转录起始点;2） -10区 又称为Pribnow盒 结构特点： 保守序列：TATAAT（T80A95T45A60A50T96） A.T较丰富，易于解链。;3） -35区 又称为Sextama box 结构特点： 其保守序列 TTGACA（T82T84G78A65C54A45） 与-10序列，相隔16-19bp。;－35 序列与－10 序列与转录效率的关系 标准启动子 －35 TTGACA －10 TATAAT 不同的启动子 a. 与标准启动子序列同源性越高 →启动强度越大 ;4） -10和-35之间距离： 间距非常重要，16-19bp的间距转录效率最高，碱基序列并不重要 间距上的突变种类： 间距趋向于17bp → 上升突