第十一章 核酸的生物合成PPT.ppt

第三篇 遗传信息的传递; 1、基因——DNA大分子上的各个功能片段，有 复制、转录等功能。 2、分子生物学中心法则及其补充。; 3、基因表达——通过转录和翻译、用基因的遗传信 息在细胞内合成有功能意义的各种蛋白质。 由于中心法则的建立，人们对核酸、蛋白质的研究 更深入了，不仅研究它们的结构、功能、相互作用以 及它们之间一套复杂、精确的调控机制、调控基因的 表达与不表达；而且在体外可对DNA进行改造，使遗 传性状改变或有目的地使基因表达产生蛋白质等基因 工程的应用。现今，人们把研究蛋白质、核酸等生物 大分子的结构、功能以及它们之间相互作用的科学划 分为又一门新的学科，即分子生物学。; 随着分子生物学的进一步研究，将来对中心 法则可能还会作出进一步补充。如RNA在中心 法则中只是参与遗传信息的表达，但在补充法 则却作为遗传物质；最近发现某些RNA分子具 有酶活性。最近，有学者提出：RNA不单是沟 通“DNA—蛋白质”之间的桥梁。RNA可能是功 能比DNA更广泛的信息分子、可能是生命起源 过程中最早出现的生物大分子。; 本篇依中心法则将介绍复制、转录、翻译。同时介绍基因调控和基因工程这两个在生命科学中处于理论和应用的最前沿课程。; 半保留复制——DNA复制时，亲代DNA的两条链都作为模板，各自指导合成互补链，形成两个与亲代DNA完全一样的子代分子，在每个子代DNA分子中均保留了一条亲代DNA链，DNA这种复制方式被称为半保留复制。;2、半不连续复制;;三、DNA聚合反应有关的酶及相关蛋白因子 1）引发酶作用——在模板的复制起始部位催化互补碱基的聚合，形成短片段RNA引物。其本质为：RNA聚合酶（是一种不同于DDRP的RNA聚合酶）。 2）引发体——为解链酶与其他复制因子结合辨认起始点时再结合引物酶形成引发体。[引发体≈解链酶+其它复制因子+引发酶] 故引发体的作用是：辩认起始点，结合在DNA模板上，解开DNA双链，催化RNA引物形成。 3）引物为什么是RNA而不是DNA——依赖于DNA模板的DNA聚合酶简称DDDP ，不能催化两个游离的dNTP聚合，而RNA聚合酶能催化两个游离的NTP聚合。;2、 DNA聚合??? 催化5′→3′的聚合反应：在引物上3′-OH未端逐个加入dNMP（由dNTP去除PPi生成），使新链不断延长。反应需： ① 模板，按A=T，G≡C合成新链。 ② 引物，引物3′-OH和下一个dNMP在聚 合酶催化下生成3′,5′-磷酸二酯键，通过3′,5′-磷酸二酯键将单个核苷酸连 成长链。 ③ 合成方向5′→3′， 模板阅读方向3′→5′。;3、DNA连接酶 1〉作用：连接DNA链3′-OH未端和另 一DNA链的5′-P未端，使二者生成磷酸 二酯键。如连接冈崎片段，DNA修复、 重组、剪接中起缺口缝合等。 2〉注意：连接酶连接的都是碱基互补基础上的双链中的单链缺口，不能连接单独存在 的DNA或RNA单链作用。;4、解旋、解链酶类 解开“超螺旋”，解开并理顺模板DNA双链， 与SSB配合维持（模板部位）单链状态。 ★ 解链酶： 作用：解开DNA双链。解链酶有两种，一是 rep蛋白（解链酶I），沿模板 3′→5′ 移动。二是解链酶II，沿模板5′→3′移 动。;5、单链DNA结合蛋白（single stranded DNA-binding Protein，SSB或DBP）， 曾称螺旋反稳定蛋白（HDP） 作用： ① 与解开的单链DNA结合，维持复制时模 板处于单链状态，防止复性。 ② 对抗核酸酶水解单链DNA，保护单链 完整性。 SSB可结合跨度为32个核苷酸单位，在DNA 解链中不断结合，脱离再结合。;6、DNA拓扑异构酶（拓扑酶） 作用：松驰超螺旋，克服解链中出现的打结缠绕、 连环现象。 拓扑酶广泛存在于真核细胞及原核细胞，可分为两型： 〈1〉I型拓扑酶：切断双链DNA中的一段，待DNA松 弛后可将切口接上。不需ATP。 〈2〉II型拓扑酶：有双重作用