第十一章核酸合成代谢PPT.pptx

第十一章核酸合成代谢概 述核酸是生物体遗传的物质基础。遗传的基本单位是基因。基因编码的生物活性产物主要是RNA和蛋白质。蛋白质的生命活动的执行者。遗传信息的传递遵循基本的法则，即从DNA→DNA（复制），从DNA→RNA（转录）,再由RNA→蛋白质（翻译）。该法则就是著名的生物遗传信息传递的“中心法则”。此法则代表绝大多数生物体内遗传信息传递的方向和规律，成为生命科学研究的基本法则。中心法则遗传信息传递的规律(复制、转录、翻译). 转录 翻译 DNA RNA蛋白质 mRNA tRNA 反转录 rRNA 转录、翻译 RNA（病毒）蛋白质（病毒） 复制复制第一节 DNA的生物合成 生物体内DNA生物合成的方式主要是复制、修复和逆转录。一、NDA复制概念和主要物质（一） DNA 复制概念及其特点 DNA复制：是亲代双链DNA按碱基配对原则， 准确形成两个相同核苷酸序列的子代DNA分子的过程。 两条DNA链都可作为复制的模板。DNA复制的特点1、半保留性2、高保真性3、半不连续性4、双向性 2、高保真性DNA复制过程中维持高保真的机制至少有三种：①严格遵守碱基配对规律②DNA聚合酶在复制延长过程中对碱基的选择功能③DNA聚合酶的校读功能3、半不连续性4、双向性（二） 参与DNA 复制的主要物质 原料：四种脱氧核苷三磷酸（dATP、 dGTP、dCTP、dTTP) 模板：以DNA的两条链为模板链，合成子代DNA。模板的利用方向是3‘－5’。 引物：一小段RNA(或DNA）为引物，在大肠杆菌中，DNA的合成需要一段RNA链作为引物。参与DNA复制的一些引物与酶类1.解螺旋酶DNA复制2.单链DNA结合蛋白3.拓扑异构酶4.引物酶5.DNA聚合酶6.DNA连接酶1、解螺旋酶解螺旋酶又称解链酶或rep蛋白利用ATP供能，作用于氢键，使DNA双链解开成为两条单链。每解开一对碱基，需消耗2分子ATP。3、拓扑异构酶 DNA复制时双链DNA解开为单链，DNA分子绕双螺旋轴反向旋转。 复制速度快，旋转的速度也很快，将达100次/秒，造成DNA分子的打结、缠绕现象发生。 需要DNA拓扑异构酶的作用，来理顺DNA双链，以配合复制过程。3、拓扑异构酶解链过程中，DNA分子会过度拧紧、打结、缠绕、连环等现象。3、拓扑异构酶拓扑异构酶作用特点既能水解 、又能连接磷酸二酯键克服解链过程中的打结、缠绕现象分 类 拓扑异构酶Ⅰ 拓扑异构酶Ⅱ作用机制切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态。反应不需ATP。拓扑异构酶Ⅰ切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。利用ATP供能，连接断端， DNA分子进入负超螺旋状态。（主要）拓扑异构酶Ⅱ拓扑异构酶Ⅰ的作用拓扑异构酶Ⅱ的作用6、DNA连接酶——催化双链DNA中的切口处的相邻5‘-磷酸基与3’-羟基之间形成磷酸酯键，从而把两段相邻的DNA链连接成一条完整的链。——不能将两条游离的DNA单链连接起来。5’3’3’HO5’ATP（NAD+）DNA连接酶AMP5’3’3’5’DNA连接酶：若双链DNA中一条链有切口, 一端是3′-OH, 另一端是5′-磷酸基,连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键，而使切口连接。DNA连接酶的功能 在复制中起接合双链中单链缺口的作用。 在DNA复制、修复、重组中均起重要作用。 是基因工程的重要工具酶之一。二 DNA复制的基本过程DNA复制是一个连续的阶段。分为三个过程：（一）起始阶段 DNA分子的复制起始部位有其特殊的碱基序列，原核生物DNA分子较小，每一DNA分子只有一个复制原点，而真核生物DNA则有多个复制原点。PS: 原核生物包括细菌,蓝藻,原绿藻,特别要记住的是支原体,衣原体,和放线菌等细菌. 真核生物包括原生生物,真菌,植物,动物。整个起始阶段包括DNA解链、引发体的形成和引物的生成3个过程。1、复制叉的形成解链的蛋白有：DnaA、DnaB、DnaC 3种蛋白，其中DnaB以前称为复制蛋白，后来称为解螺旋酶。单链DNA结合蛋白质的意义：①保持已解开的单链处于单链状况，②保护已解开的单链不被核酸酶水解，③维持复制叉的适当长度以利于脱氧核苷酸依据模板参入。拓朴异构酶可以将打结的DNA链切断，或者通过切断与旋转和再连续作用实现DNA超螺旋的转型，把正超螺旋变为负超螺旋，有利于解链的继续。复制叉复制叉复制原点由DnaA蛋白识别， 在原点由DnaB蛋白（解螺旋酶）将双螺旋解开成单链状态，分别作为模板，合成其互补链(DNA双链的解开还需DNA拓扑异构酶Π 、 SSB),在原点处形成一个眼状结构，叫复制眼。 DNA复制进行时，在眼的两侧出现两个叉子状的生长点，叫复制叉。在复制