111植物组织培养理论基础.pptVIP

第11章 植物组织培养 11.1 植物组织培养的理论基础 11.2 植物组织培养的基本技术 11.3 愈伤组织的诱导、形成及分化 11.1 植物组织培养的理论基础 11.1.1 植物的无性繁殖 11.1.2 植物细胞全能性理论 11.1.3 植物细胞的脱分化和再分化 11.1.4 离体培养下的遗传与变异 11.1.1 植物的无性繁殖 被子植物的繁殖方式：有性生殖、无性繁殖 无性繁殖不发生遗传重组，遗传性状稳定 11.1.2 植物细胞全能性理论 11.1.3 植物细胞的脱分化和再分化 细胞分化与基因组变化 细胞分化与极性建立 细胞分化的过程 2. 细胞的脱分化（Dedifferentiation） 外植体：植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞和原生质体等。 脱分化后的细胞，经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团称为愈伤组织。愈伤组织的种类 1、胚性愈伤组织 （Embryonenic callus）：表面光滑、组织结构紧凑、细胞小、再生力强。胚性愈伤组织容易形成胚状体，所以被称为胚性愈伤组织。 2、非胚性愈伤组织：表面粗糙、组织结构疏松、细胞大。  注意： 1、并不是所有的细胞脱分化的结果都必然形成愈伤组织。有些植物体的细胞脱分化以后直接形成胚性细胞，进而形成体细胞胚。2、多数愈伤组织内的细胞并不都是未分化的细胞，即同一愈伤组织内的细胞之间其状态存在一定的差异。 细胞脱分化过程中生理活动与细胞结构的变化 细胞脱分化过程中生理活动与细胞结构的变化 细胞脱分化的调控机理 细胞周期调控；激素的作用；PSK (植物硫化激动素phytosulfokine )的调控作用；染色体变化 细胞分裂与愈伤组织形成 脱分化是细胞生理状态的改变，而形成愈伤组织是离体培养中的一个阶段。 3.细胞再分化和器官发生 植物的离体器官的发生：培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根（adventitious roots）、不定芽（ adventitious shoots）等器官的过程。　不定根：从茎、叶上生出的根叫做不定根  不定芽：不是从叶腋或枝顶发出，而是从叶子、根上或从树干上发出的芽 离体培养中器官发生的方式 器官分化的过程 在有些情况下，外植体不经过典型的愈伤组织即可形成器官原基，这一途径有两种情况，一是外植体中已存在器官原基，进一步培养即形成相应组织器官进而再生植株，另一种情况是外植体形成分生细胞团后在分生细胞团上直接形成器官原基。 一般认为，芽和茎原基通常起源于培养组织中比较表层的细胞，即外起源，而根原基则发生在组织较深处，是内起源。 影响器官分化的因素 具有变态器官（如鳞茎、球茎、块茎等）的植物，在培养中往往也容易形成相应的变态器官，如百合、水仙等鳞茎类植物培养中往往易形成小鳞茎；草石蚕、马铃薯等块茎植物培养中则可观察到块茎的形成。这一特性也使以变态器官为繁殖体的植物实现实验室工厂化生产种子提供了可能。 2.生长调节剂 3.光照 4.温度 11.1.4 离体培养下的遗传与变异 一、培养细胞变异的类型 二、变异原因： 三.影响离体培养细胞遗传变异的因子 四.体细胞无性系变异的诱导 五、优良变异的筛选方法 六.体细胞无性系变异的利用 七、变异的抑制 一、培养细胞变异的类型 培养细胞变异的类型1、自发产生的变异，即培养物在未加诱变因素的情况下产生变异。2、诱发产生的变异，即培养物在诱变因素作用下产生变异。前者变异率一般在10-7~10-6之间，后者一般在10-5~10-4。 1、自发产生的变异 B.畸形变异 最常见的变异是白化苗突变，其次是产生丛生芽、肉质茎芽等。 C.非遗传变异 b、生理适应（physiologic adaptation）变异 通常是在某种外界条件存在时才表现出变 异，外界条件不存在时，变异也随之消失。 2、诱发产生的变异（抗镰刀菌毒素细胞变异系的分离）将诱导产生的愈伤组织接种在含不同浓度梯度毒素的培养基上筛选得到半致死剂量浓度、100%生长抑制生长浓度、 致死计量浓度以半致死剂量为最低浓度，逐代增加毒素浓度至致死剂量浓度  转移至无毒素培养基继代培养两代转移到致死剂量和高于致死剂量的培养基培养，统计存活率 二、变异原因： 2、培养条件引起的变异 三.影响离体培养细胞遗传变异的因子 四.体细胞无性系变异的诱导 诱变剂类型： 五、优良变异的筛选方法 2、体细胞变异材料的选择 （3）适当的细胞类型也是提高体细胞突变系筛选效率的重要条件。虽然各种状态下的培养细胞均可以作为分离突变细胞的来源，但实践中原生质体