生物选修Ⅰ：2-1-微生物实验室培养.pptVIP

知识梳理 一、培养基 1、种类 2、营养要素 二、无菌技术 1、获得纯净培养物（防止杂菌污染的主要措施） 2、区分消毒和灭菌 三、大肠杆菌的纯化培养 1、牛肉膏蛋白胨培养基 2、纯化培养的方法： 3、菌种保藏的两种方法： 一、培养基 课堂探究 探究一：消毒与灭菌 牛肉膏、蛋白胨培养基 探究二 课堂探究 纯化大肠杆菌——平板划线法 纯化大肠杆菌——平板划线法 纯化大肠杆菌——平板划线法 探究三 1、消灭接种环上的微生物；消灭接种环上残留菌种防止细菌污染环境和操作者 2、防止高温杀死菌种 3、划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 平板划线法 纯化大肠杆菌——稀释涂布平板法 探究四 1、应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。 2、大小不同；菌落分布位置相同。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落中微生物个体数增多。 3、有培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。 拓展思考 1、如何检验培养基的制作是否合格? 2、如何检查接种操作是否符合无菌要求？ 巩固练习 DDDACD * 2-1 微生物的实验室培养 学习目标： 1．知识与技能: a、了解培养基的用途、种类及一般成分， b、掌握培养基制作的一般的步骤， c、掌握微生物分离中的划线法和涂布法。 2．过程与方法: 学会一般的消毒、灭毒的方法，进行无菌技术的操作。 3．情感、态度与价值观: 体验微生物与现代生物技术之间的密切的关系。? 【重点突破】 培养基的制备、微生物的培养的操作。 目的明确、营养协调、酸碱适宜 P15 碳源、氮源、磷酸盐和维生素 约8分钟 积极参与 互帮互助 小组讨论 约15分钟 独立思考 及时标注 自主探究 探究一 探究二 使用时间 学习要求 学习环节 学习内容 我的课堂我做主（自主探究） 1、请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。 如果需要，请选择合适的方法： （1）培养细菌用的培养基与培养皿； （2）玻棒、试管、烧瓶和吸管； （3）实验操作者的双手。 灭菌 消毒 2、在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？ 牛肉膏和蛋白胨都容易吸潮。 3、溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？ 防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。 琼脂粉 操作步骤： 计算→ 称量→溶化→倒平板 1、手摸感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2、通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3、平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 4、不能。空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。 约8分钟 积极参与 互帮互助 小组讨论 约15分钟 独立思考 及时标注 自主探究 探究三 探究四 使用时间 学习要求 学习环节 学习内容 我的课堂我做主（自主探究） ③ ① ② ④ 培养菌落图 6支试管，分别加入9ml无菌水 1ml 101 1ml 102 1ml 103 1ml 104 1ml 105 1ml 106 ⑵稀释涂布平板法： a.梯度稀释菌液： 菌液 微量 移液器 滴 灼 涂 平板划线法和稀释涂布平板法的比较 优点 缺点 平板划线 分离法 可以观察菌落特征，可对混合菌进行分离 不能计数 稀释涂布 平板法 可以计数，可以观察菌落特征 吸收量较少、较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求 微生物的培养 基础 知识 实验操作 结果分析与评价 培养基 定义： 分类： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养物质 固体培养基 液体培养基 无菌技术 培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法 定义： 消毒与灭菌 常用灭菌方法 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 纯化大肠杆菌 本课小结 *